"M059J Thawing人腦神經膠質瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
M059J Thawing人腦神經膠質瘤細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：６-１：８傳代；每周換液２-３次。
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
M059J Thawing人腦神經膠質瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。【材料和試劑】１)無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預熱培養(yǎng)用液：把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內預熱；２)用７５％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太?。唬?準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內；７)從培養(yǎng)箱內取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
C12細胞系相關產品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
6-T CEM細胞系相關產品：1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞
AG06814-J細胞系相關產品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
KM-H2細胞系相關產品：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
CHP-100細胞系相關產品：PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
NCI-HUT-292細胞系相關產品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
KYSE140細胞系相關產品：H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞
HBVP細胞系相關產品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
H-128細胞系相關產品：NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
COLO-HSR細胞系相關產品：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
Human Liver-7702細胞系相關產品：JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞
NS-I/1細胞系相關產品：3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
MV4II細胞系相關產品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關產品：AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
NCIH2172細胞系相關產品：MCA-205細胞、F-81細胞、NCTC clone 1469細胞
C32 mel細胞系相關產品：MESSA-DX5細胞、Tn5 B1-4細胞、KYSE-150細胞
NGEC細胞系相關產品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
FHs74 Int細胞系相關產品：HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
PL-9細胞系相關產品：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
LC-2-Ad細胞系相關產品：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
Oregon J-111細胞系相關產品：RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞
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MES-SA-Dx5細胞系相關產品：CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞
MDCK (NBL-2)細胞系相關產品：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞
SNU-C1細胞系相關產品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
H82sclc細胞系相關產品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
M059J Thawing人腦神經膠質瘤細胞系
CMT93細胞系相關產品：SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞
PTK 1細胞系相關產品：Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞
H-1703細胞系相關產品：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
H-498細胞系相關產品：NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
ACC-2細胞系相關產品：NCIH226細胞、U373 MG細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞
COLO-829細胞系相關產品：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
NCI-H2170細胞系相關產品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
HET-1A細胞系相關產品：GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
HA細胞系相關產品：HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞
BC-019細胞系相關產品：OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞
AN3 CA細胞系相關產品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
Hs281T細胞系相關產品：HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞
SW-837細胞系相關產品：P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
DHL-2細胞系相關產品：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
LS180細胞系相關產品：SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞
SK-N-AS細胞系相關產品：FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
C57/B6-L細胞系相關產品：Hs611T細胞、CCD-112CoN細胞、P3 88 D1細胞
4T1細胞系相關產品：BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞
RPMI-1788細胞系相關產品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
AZ521細胞系相關產品：3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
GM05372E細胞系相關產品：SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞
PANC3.27細胞系相關產品：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
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WSU-DLCL(2)細胞系相關產品：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
ssMCF-7細胞系相關產品：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
S-16細胞系相關產品：Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞
OCM-1A細胞系相關產品：A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
RS(4;11)細胞系相關產品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
RL-95-2細胞系相關產品：SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
NCIH1693細胞系相關產品：C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞
KM12-SM細胞系相關產品：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
RMC-1細胞系相關產品：VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞
WM 239A細胞系相關產品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
M059J Thawing人腦神經膠質瘤細胞系
HEL細胞系相關產品：OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
NCI-Hut 125細胞系相關產品：R1800[RA]細胞、NMCG-1細胞、Strain V細胞
SK HEP 01細胞系相關產品：HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
C12細胞系相關產品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
QGY 7701細胞系相關產品：NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
NCIH2591細胞系相關產品：KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
MN60細胞系相關產品：COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
C3H 10T1/2細胞系相關產品：CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞
MDA-MB 231細胞系相關產品：HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關產品：SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
Caki-2細胞系相關產品：SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞
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