"KS-1 [Human glioblastoma] Thawing人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
KS-1 [Human glioblastoma] Thawing人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KS-1 [Human glioblastoma] Thawing人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
KOPN8細胞系相關產(chǎn)品：HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞
Hs 604.T細胞系相關產(chǎn)品：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞
KATO 3細胞系相關產(chǎn)品：WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞
Swiss3T3細胞系相關產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
293H細胞系相關產(chǎn)品：SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞
COLO 679細胞系相關產(chǎn)品：CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關產(chǎn)品：CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
MeT 5A細胞系相關產(chǎn)品：SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞
Tb1.Lu細胞系相關產(chǎn)品：CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
SK-MES-1細胞系相關產(chǎn)品：NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞
BGC-823細胞系相關產(chǎn)品：Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
SVGp12細胞系相關產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
GM07404細胞系相關產(chǎn)品：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
DHL-8細胞系相關產(chǎn)品：NS-1細胞、THLE-3細胞、RINm5F細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關產(chǎn)品：LWnt-3A細胞、OV433細胞、Tissue Culture-1細胞
Hs-274-T細胞系相關產(chǎn)品：GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
YD-38細胞系相關產(chǎn)品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
ME16C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
NCI-SNU-620細胞系相關產(chǎn)品：NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞
MDAMB436細胞系相關產(chǎn)品：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
MDAMB436細胞系相關產(chǎn)品：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
CMT.64細胞系相關產(chǎn)品：Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞
3T3 J2細胞系相關產(chǎn)品：Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞
CCD-1112sk細胞系相關產(chǎn)品：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
Hs888Lu細胞系相關產(chǎn)品：COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞
KS-1 [Human glioblastoma] Thawing人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品：Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
HepG2-luc細胞系相關產(chǎn)品：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
ECC1細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞
SK-HEP-1細胞系相關產(chǎn)品：SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞
HT-1197細胞系相關產(chǎn)品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
T241細胞系相關產(chǎn)品：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
RBL-I細胞系相關產(chǎn)品：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
VK2/E6E7細胞系相關產(chǎn)品：ESC細胞、H660細胞、C17細胞
Pa16C細胞系相關產(chǎn)品：F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
H-1355細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞
HSC/mHSC細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
CFSC-2G細胞系相關產(chǎn)品：H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
SW 1222細胞系相關產(chǎn)品：H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
HAC-84細胞系相關產(chǎn)品：Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞
M-20細胞系相關產(chǎn)品：HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
MBVP細胞系相關產(chǎn)品：COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
MBVP細胞系相關產(chǎn)品：COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
Hs 274.T細胞系相關產(chǎn)品：KU.812細胞、HECV細胞、NCIH23細胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細胞系相關產(chǎn)品：XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞
H-1618細胞系相關產(chǎn)品：PCI:SG-231細胞、JROECL 33細胞、BC-019細胞
SNU387細胞系相關產(chǎn)品：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
MCF12A細胞系相關產(chǎn)品：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關產(chǎn)品：EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
KCL22細胞系相關產(chǎn)品：GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
CL1.0細胞系相關產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
SK-ChA-1細胞系相關產(chǎn)品：CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞
PLC細胞系相關產(chǎn)品：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
UCLA NPA871細胞系相關產(chǎn)品：MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
H2085細胞系相關產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
GM03671C細胞系相關產(chǎn)品：JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
HEK 293-F細胞系相關產(chǎn)品：TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞
WEHI3細胞系相關產(chǎn)品：Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞
KS-1 [Human glioblastoma] Thawing人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞系
TE-6細胞系相關產(chǎn)品：SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
AN-3細胞系相關產(chǎn)品：U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
NS20-Y細胞系相關產(chǎn)品：F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
T84細胞系相關產(chǎn)品：A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞
293H細胞系相關產(chǎn)品：SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
LA-N-6(OAN)細胞系相關產(chǎn)品：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞
LCMS細胞系相關產(chǎn)品：KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
PL-12細胞系相關產(chǎn)品：MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞
K299細胞系相關產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
SUP-B1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
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