"D283 Med Thawing人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
D283 Med Thawing人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞接收操作說(shuō)明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說(shuō)明及相應(yīng)的細(xì)胞說(shuō)明書(shū)。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開(kāi)包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來(lái)再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：每周換液２-３次。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周?chē)?，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
D283 Med Thawing人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮細(xì)胞的多細(xì)胞聚集體，和一些貼壁細(xì)胞
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽(tīng)說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1E8-H細(xì)胞、H548細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
LAPC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSAT細(xì)胞、SNU886細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞
MDA-MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細(xì)胞、A375S2細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞
HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞
hSCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞
DiFi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL10細(xì)胞、MLM細(xì)胞、8305C細(xì)胞
A 2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞
LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞
RPMI 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞、H-735細(xì)胞
MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1522細(xì)胞、MS-751細(xì)胞、YES-2細(xì)胞
Hs 746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：APRE-19細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞
HT 1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1A細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、SW-480細(xì)胞
HSC 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞
C33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
TCCSUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DiFi細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES1細(xì)胞、P3.653細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞
LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞
LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞
MKN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK2細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞、Ly3細(xì)胞
CHP 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞
OCI-AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞
GA-10 (Clone 4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM細(xì)胞、CEM細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞
D283 Med Thawing人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435細(xì)胞、H-82細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞
PLB985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞
Fox/NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
OCI-AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞
KE-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs706T細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞
NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEG-3細(xì)胞、SW 839細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞
MUM2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL4細(xì)胞、H-187細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞
LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞
NCI-H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FC33細(xì)胞、GM04671細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞
LNCaP C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB1細(xì)胞、HCE細(xì)胞、MAD109細(xì)胞
TF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB1-RGB細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞
NE1-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU668細(xì)胞、H-1105細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞
EC109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra No. 1細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞、COLO678細(xì)胞
H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-3細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞
WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞
H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MJ細(xì)胞、H-2009細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞
MDA-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA1細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞
MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAMC82細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
HCC-1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSUDLCL2細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞
MC3T3-E1(C4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC subclone 11細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞、P388D1細(xì)胞
NRK 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞
L6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞
Colo16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBMEC細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
DU-4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1359細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞
D283 Med Thawing人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
H-2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞
JHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細(xì)胞、LP1細(xì)胞、IM95細(xì)胞
Hs27F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376.T細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞
SKRC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞
CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞
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