"WB-F344 Thawing大鼠肝上皮樣干細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
WB-F344 Thawing大鼠肝上皮樣干細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
WB-F344 Thawing大鼠肝上皮樣干細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
H-2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
HKC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-982細(xì)胞、PL9細(xì)胞、BL1339細(xì)胞
NCl-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-027細(xì)胞、HITT15細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞
MMAc-Serum Free細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly18細(xì)胞、TE-4細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞
HeLa.S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ND7/23細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、BT474細(xì)胞
PMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細(xì)胞、FM-88細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
SK LU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT6細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞
SK Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324MED細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞
OVCA-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m5F細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞
OKa-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1788細(xì)胞、C33細(xì)胞、N-87細(xì)胞
KU 812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226S細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞
NCIH69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞
RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
WM115-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-Wnt3A細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞
brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH-6細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞
HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞
SP-2/0-AG14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD2細(xì)胞、MN60細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞
LC-2/ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞、AG 9細(xì)胞
RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞
ZR7530細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2-BBE細(xì)胞、293-F細(xì)胞、H-1092細(xì)胞
MC3T3E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc10.05細(xì)胞、RH7777細(xì)胞、UT7細(xì)胞
WB-F344 Thawing大鼠肝上皮樣干細(xì)胞系
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
LAN5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞
MDAMB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL140細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞
WRL 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAT2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞
NIH3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
MCF-7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-Ca.256細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞
Huh-7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cells細(xì)胞、NPA87細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞
SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞
Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞
NCIH1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞
McA-RH 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H157細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞
DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞
NCIH2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Colon 38細(xì)胞、WB F344細(xì)胞、KE37細(xì)胞
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
H-2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細(xì)胞、MO59J細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞
CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞
MSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2227細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞
QGP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞
A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
NCI-H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞
H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞
X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPASMC細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞、SU4細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1522細(xì)胞、MS-751細(xì)胞、YES-2細(xì)胞
EJ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞
HEK-293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK-2細(xì)胞、Reh細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞
PC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 982細(xì)胞、DV90細(xì)胞、C33A細(xì)胞
CHP-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM-1細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞
RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞
WB-F344 Thawing大鼠肝上皮樣干細(xì)胞系
HCT_116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞、WB F344細(xì)胞
SF-763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞
Hs 742.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High5細(xì)胞、H-1435細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞
BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細(xì)胞、A2780細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞
PG-4 S+L-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細(xì)胞、SW-780細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞
MUTZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞
Co320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOMEC細(xì)胞、H-508細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞
LAN-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞
SHIN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910PM細(xì)胞、H187細(xì)胞、PC 61細(xì)胞
NCI-Hut 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞、Strain V細(xì)胞
KNS42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4II細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞
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