"HeLa Thawing人宮頸癌細胞系
細胞背景資料:HeLa是個來自人體組織經(jīng)連續(xù)培養(yǎng)獲得的非整倍體上皮樣細胞系,它由GeyGO等在1951年從31歲女性黑人的宮頸癌組織建立。經(jīng)原始組織切片重新觀察,Jones等將其診斷為腺癌。已知該細胞系含有人乳頭狀瘤病毒HPV18序列,需在2級生物安全防護臺操作。該細胞角蛋白陽性,p53表達量較低,但表達正常水平的pRB(視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制因子)。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HeLa Thawing人宮頸癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次
細胞培養(yǎng)過程中,總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題,一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法,希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助:1)觀察細胞狀態(tài):貼壁細胞密度達到85-90%,即可以細胞凍存形式進行保藏,拍照,記錄細胞狀態(tài);2)細胞清洗:培養(yǎng)皿表面消毒后,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液,加入12mlPBS,輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞,隨后吸除PBS清洗液;3)細胞消化:將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中,完全覆蓋細胞,置于顯微鏡下觀察(期間禁止搖晃培養(yǎng)皿),當細胞剛開始脫落時,立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余約0.5ml胰酶,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化,每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài),至細胞成流沙狀完全脫落,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,加入12ml完全培養(yǎng)基,終止消化;4)細胞離心:將終止消化后的細胞懸液吹打均勻,吸取至15ml離心管中,1000r/min(110g),離心3min;5)細胞凍存:離心后去除細胞上清液,按照凍存細胞量5*10^5/ml,吸取凍存液重懸細胞沉淀,吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中,進行凍存;6)細胞保藏:凍存管做好標記,放至程序降溫盒中,于4℃冰箱放置30min,轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜,將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HeLa Thawing人宮頸癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞凍存知識普及:細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。 采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1到-2℃/min,當溫度低于-25℃時可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
D341MD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞
ABE8.1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
GC-1spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
CWR22-R1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
Ramos-RA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
Hep 3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞
HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
TE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
NCIH2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
H-660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞
CCLP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞
hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
P30/OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-HN13細胞、TPC-1細胞、EMT-6細胞
HT-29/CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:231-luc細胞、NCIH2107細胞、SW1417細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
CCD1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞
HIT clone T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
MCA 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞
NCI-H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞
NCI-H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞
YD-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞
DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
HeLa Thawing人宮頸癌細胞系
PF-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞
HEK-293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
KMBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
SK-NM-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVSMC細胞、WM 2664細胞、SO-Rb 50細胞
LNCaP subline C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
NCTC-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
253J-Bladder-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
ES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞
SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
SC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞
CA 46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
KU-812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
FTC-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
NCI-HUT-596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞
F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO 175.T細胞、H23細胞、SN12-PM6細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
MRC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
H-2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
B10BR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞
Oka-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
NCIH2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
C3H10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
HeLa Thawing人宮頸癌細胞系
H-2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞
HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
ROS-17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
H-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞
67NR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞
OCI-Ly 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
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