"Ishikawa Thawing人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
Ishikawa Thawing人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞接收操作說明：請仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴(yán)重的，會導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，３-４天換液一次
細(xì)胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們最常見的一個實(shí)驗(yàn)。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Ishikawa Thawing人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。【分裝稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞
H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SV-neo細(xì)胞、H2023細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞
PLA801-95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞
CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞
AML12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3-E1細(xì)胞、PIG3細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞
CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞
HEK 293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞
C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞
LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞
BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞
HMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)-M17細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞
MDA PCa 2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO357細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞
NCI-H1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-407細(xì)胞、Case 3細(xì)胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞
RAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2279細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞
NCI-H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KBM5細(xì)胞
A-875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-433細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞
C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞
HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
SK-LMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞
SK-LMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
HeLa S 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-38細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞、L-363細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞
T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞
Ishikawa Thawing人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細(xì)胞、T_T_細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞
STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY 7701細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞
NTera-2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH7細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞、TKB1細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
Panc 8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-3H-1細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞
Kit 225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-F442A細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C41細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞
HCT.116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-Rb 50細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞
BRL-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞
OCI-Ly 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dc3細(xì)胞、LA 4細(xì)胞、SR-786細(xì)胞
BALB/3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-ori細(xì)胞、RC-2細(xì)胞、LS-174細(xì)胞
HCS-2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 c18細(xì)胞、PVEC細(xì)胞、GM03570細(xì)胞
P3J HR1-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-101D細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞
BERH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1-S細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞
BetaTC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞、A-172細(xì)胞
RD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞
BT325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY細(xì)胞、J82細(xì)胞、HuH7細(xì)胞
EBC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞
MA-c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69/P細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞
CL-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-3細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIO-M1細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞
RGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683.T細(xì)胞、L615細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞
IOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a-2細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞
FHs74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞
Jijoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞
SW-839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY19細(xì)胞、H-87細(xì)胞、Hi5細(xì)胞
PLA-801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL124細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、PC-3細(xì)胞
Ishikawa Thawing人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
GBC-SD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞、PL5細(xì)胞
AK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、HGMC細(xì)胞、TE-13細(xì)胞
NCI-H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞
SPCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-688A-T細(xì)胞、BC-020細(xì)胞、CAL62細(xì)胞
huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞
HCC-1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159PT細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞
EnCa1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞
NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞
33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞
SK-UT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞
WERI-Rb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞
"