"HEK293-FT Thawing表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞系
細胞背景資料：該細胞穩(wěn)定表達SV４０大T抗原，并且促進最適病毒產物的產生。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HEK293-FT Thawing表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HEK293-FT Thawing表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：圓形
L Wnt-3A細胞系相關產品：HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞
NT2/D1細胞系相關產品：H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞
A431/P細胞系相關產品：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞
BC3H-1細胞系相關產品：769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞
KYSE-70細胞系相關產品：HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞
CAOV3細胞系相關產品：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞
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SU-DHL-5細胞系相關產品：WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞
16-HBE細胞系相關產品：MN60細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、IPLB-Sf21-AE細胞
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2V6.11細胞系相關產品：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
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Ball 1細胞系相關產品：KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
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HEK293-FT Thawing表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞系
SUM 190細胞系相關產品：SV-HUC-1細胞、SH-SY5Y Parental細胞、HPAF-II/CD18細胞
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C1R細胞系相關產品：HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞
TMD-8細胞系相關產品：293-FT細胞、SKNBE-2細胞、CEM-0細胞
GOTO細胞系相關產品：MTC-TT細胞、OV 1063細胞、KRC-Y細胞
Loucy細胞系相關產品：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
2780細胞系相關產品：aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞
COLO-824細胞系相關產品：Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
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NCIH1299細胞系相關產品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
SK-ES細胞系相關產品：LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞
GDM-1細胞系相關產品：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
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Human Embryonic Kidney 293細胞系相關產品：My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞
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C4-2 Bone metastatic細胞系相關產品：H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
293 H細胞系相關產品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
ChaGo-K-1細胞系相關產品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
RPMI-1788細胞系相關產品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
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