"KP-N-NS Thawing人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:源自腦轉(zhuǎn)移灶的腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
KP-N-NS Thawing人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠,壓力足夠!尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無(wú)雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見(jiàn)呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細(xì)胞仍可生長(zhǎng),但時(shí)間長(zhǎng)之后,細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤(pán)里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤(pán)加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí),使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細(xì)胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無(wú)補(bǔ),建議舍棄該污染細(xì)胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細(xì)胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個(gè)別污染,可能是操作問(wèn)題,就要注意操作。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻,通常操作步驟:做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞鋪板大概是我們最常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液,沿孔壁(稍離開(kāi)一點(diǎn)孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基,晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤(rùn)孔底,其它孔依此類推,這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的,細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底,注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒(méi)有96孔板好掌握,效果沒(méi)有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后),先順時(shí)針搖晃3次,馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KP-N-NS Thawing人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題,見(jiàn)到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié),這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn),因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近300種細(xì)胞,常用于做實(shí)驗(yàn)的,累積有百余種,可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開(kāi)始做我的篇專題,并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題,我就拋磚引玉,下面幾點(diǎn)拙見(jiàn),可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn),也見(jiàn)到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn),就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識(shí),如果不對(duì)之處,歡迎指正,總結(jié)下來(lái),細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問(wèn)題,很多時(shí)候bottleneck沒(méi)有找到,雖然通過(guò)其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?,總覺(jué)得自己沒(méi)有經(jīng)驗(yàn),而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的問(wèn)題。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
SupT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB611細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞
NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞
Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞
OCI/AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRMECs細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、PC.3細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
Colon 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、Ramos細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞
H-1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S180細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞
FRhK4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH508細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞
TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞
GM16136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM1細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞
WM-239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8D1A細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞、2PK3細(xì)胞
NCI-H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細(xì)胞、MC38細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞
Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞
293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADRRES細(xì)胞、JVM3細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞
JHH-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞
H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL5細(xì)胞、H748細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞
LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞
SUDHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、GM0637細(xì)胞
BC-025細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos G6.C10細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞
JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞
JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞
HCC-1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159PT細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞
MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞
W256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞
KP-N-NS Thawing人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
MDA-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA1細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞
NCI-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-2細(xì)胞、Rat1細(xì)胞、LS180細(xì)胞
SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1395細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞
A-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD 2細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
MF2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266mel細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞、SU.86細(xì)胞
SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC1細(xì)胞、COR L279細(xì)胞、ES-2細(xì)胞
PLA801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388-D1細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞
Farage Original Line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞
Ca 9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞
TE353.SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-3細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、BC-021細(xì)胞
RWPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞、TE3細(xì)胞
JROECL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411N細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞
SNU407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細(xì)胞、SNU251細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
AK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、HGMC細(xì)胞、TE-13細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
LNCaP clone FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、H2330細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞
GAK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞
293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-IE8細(xì)胞、JIII細(xì)胞、C8161細(xì)胞
OUMS23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA795細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞
FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞
A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞
no.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞
MLTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV3細(xì)胞、HemECs細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞
HCC-1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno 293細(xì)胞、MCFs細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞
KP-N-NS Thawing人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
LL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞
VM-CUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC4細(xì)胞、MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞、SW-948細(xì)胞
H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639 V細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞、NOK細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2BBe細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞、H157細(xì)胞
BCaP 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞
C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞
VMRCLCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞
HCC2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7402細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
AtT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138MG細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞、PA12細(xì)胞
NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞
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