"OS-RC-2 Thawing人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:來(lái)源于日本人的腎臟腫瘤細(xì)胞。 可以移植到裸鼠。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
OS-RC-2 Thawing人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞接收操作說(shuō)明:請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說(shuō)明及相應(yīng)的細(xì)胞說(shuō)明書(shū)。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用,懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多,當(dāng)然,有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞,但是,長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來(lái)說(shuō),貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生),個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細(xì)胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后,拆開(kāi)包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上,再處理細(xì)胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細(xì)胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上,再處理細(xì)胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時(shí)T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話,不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來(lái)再換大的,不然會(huì)長(zhǎng)得很慢,嚴(yán)重的,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn)),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細(xì)胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后,直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題,客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō),針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過(guò)低,細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng);4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短:時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)胞死亡;時(shí)間過(guò)短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因,做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過(guò)驗(yàn)證;4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
OS-RC-2 Thawing人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi))。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
CNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞
NCM460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞
P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞
Psi-2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT 8810細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞
OV-2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPAM-WT細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞、R1610細(xì)胞
Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞
EU-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
SU-86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA 7細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
HCC 94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624mel細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
GP5d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES-1細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞、Vero細(xì)胞
HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞
UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、NE1細(xì)胞
HCT FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
KM12SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
Hs832T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA I細(xì)胞、SCL I細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞
MDA 1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC2/Ad細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞
MDA 1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC2/Ad細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞
SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞
PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
H2052_MM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-368細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞
OS-RC-2 Thawing人腎癌細(xì)胞系
3 LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
U-138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞
NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1sq細(xì)胞、NH-6細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞
TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞
OLN 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co320細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞
Tb 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.10A細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞、NHRF細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞
Hep 3B2_1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC 7721細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞、HEH2細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
NCI-H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 1細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞
CL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7404細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞
P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2008細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-1細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞、MB 157細(xì)胞
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
Co 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs1.Tes細(xì)胞、KNS81細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞
SN12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞
SUM159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS153細(xì)胞、KMH2細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞
SW 527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-3細(xì)胞、H1435細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞
NB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHC-ST1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞
MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞
Panc8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04680細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞
HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞
HNTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞、MCM細(xì)胞
343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fox/NY細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
130-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361-mel細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞
NTERA-2 clone D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H226細(xì)胞、H-226細(xì)胞、C81-61細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
TSCCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1-289細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞
OS-RC-2 Thawing人腎癌細(xì)胞系
H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞
SNK-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞
SNK-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞
EoL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG-01細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞
PL-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-29細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87 MG細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
OCI/AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC3細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞
H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞
MADISON LUNG TA-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞、C666-1細(xì)胞
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