"786-O Thawing人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自一位原發(fā)性腎透明細(xì)胞癌患者。該細(xì)胞有微絨毛和橋粒，能在軟瓊脂上生長。此細(xì)胞生成一種PTH（甲狀旁腺素）樣的多肽，與乳癌和肺癌中生成的肽相似，其N端序列與PTH相似，具有PTH樣活性，分子量為６０００D。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
786-O Thawing人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進行細(xì)胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
786-O Thawing人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細(xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
SK-UT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞
H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞
UMNSAH-DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC10細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞
OVCAR.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2052細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞
TH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、SC1細(xì)胞
HCT/Taxo1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞
LC1-Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCI1細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞
SKMEL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞
GP293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812細(xì)胞、CL-11細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
NCI H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞
WC00059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232細(xì)胞、HcaF細(xì)胞、C643細(xì)胞
NCI-H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rh30細(xì)胞、3AO細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
KMST-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF-1細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞
OCI-AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320DM細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞、HNE1細(xì)胞
E0771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞、kms 11細(xì)胞
NUGC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞
KYSE 510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞
KYSE 510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞
NCI-H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85.T細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞、RAG細(xì)胞
Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞
SO-Rb 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA細(xì)胞、H-1385細(xì)胞、RASMC細(xì)胞
L428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞、H82細(xì)胞
786-O Thawing人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
KYSE-150細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞
SUDHL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92-MI細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞
38C13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞
ESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-79細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞
Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP 1細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞
HG2855細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P116細(xì)胞、H-735細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞
Lewis lung carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duck embryo細(xì)胞、293H細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞
WBF344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細(xì)胞、TF-1細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞
QG-56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SY5Y細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞、SB細(xì)胞
H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIO-M1細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞
LN 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMVEC細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞
4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細(xì)胞、T173細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
CORL88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞、RT-4細(xì)胞
DSL-6A-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh 74細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞、HMEC細(xì)胞
GLC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCMK2細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞、He-La細(xì)胞
SUDHL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92-MI細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞
COLO 738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞
KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞
OVCA432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 19-19細(xì)胞、REC-1細(xì)胞、H-838細(xì)胞
CEM T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL5細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞
SNUC2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 549細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞
U-226AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞
HS-729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞
BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
GH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC090細(xì)胞、HCT15細(xì)胞、293T細(xì)胞
M109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
786-O Thawing人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞
COR-L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLC-7細(xì)胞、JCA1細(xì)胞、H-1385細(xì)胞
NCI-H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293S細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞
OCI-Ly 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE8細(xì)胞、RGCs細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞
PLC-PRF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH345細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞、207細(xì)胞
HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞
ABE8.1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞
Th17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞
HAPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO細(xì)胞、H1944細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞
CMT64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞、LMH細(xì)胞
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