"BCaP-37 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：源自一位４８歲女性乳癌患者。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
BCaP-37 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對延長。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長滿
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BCaP-37 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時(shí)候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?，總覺得自己沒有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
MonoMac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細(xì)胞、LA795細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞
FF-WT-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HPNE細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞、H-4細(xì)胞
COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞
NBL-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞
PC3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NWA細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞、X63.Ag8.653細(xì)胞
FM-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM H-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞、N1E115細(xì)胞
Be Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB330細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞
3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞
SNK6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞
A10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL2細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞、OV90細(xì)胞
TB-1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細(xì)胞、b.End3細(xì)胞、D341MD細(xì)胞
OVCAR433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL/FU細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞
FaDu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞
HCC-9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNGHOS細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞
TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A20細(xì)胞、CORL51細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞
OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
NCI.H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE450細(xì)胞、751細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
NCI-H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞
MX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BXPC3細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞
H-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞
H-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞
MV4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞、PA1細(xì)胞
343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞、H-747細(xì)胞
HCASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR-8383細(xì)胞、J-774細(xì)胞、MA-104細(xì)胞
NCI H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞
BCaP-37 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞
QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
NCI-SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞
WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞
LS174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung-65細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
NRK-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞、PC9細(xì)胞
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞
DU145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKN細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞
B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞
A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞
HS766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL(2)細(xì)胞、HMO6細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞
SCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、4175細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞
SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞
Hs940.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 HEK細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞、IGROV細(xì)胞
H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-1細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞
C17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-453細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞
HPAFII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-1細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞
TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞
NCIH820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞
HTR8svn細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-9204細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞、HT-144細(xì)胞
Ej138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞
H-2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細(xì)胞、RL-952細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/CAR細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞、HuH6細(xì)胞
MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞
BCaP-37 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
H-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
INS1-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95D細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞
rRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞
130-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361-mel細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞
IEC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H865細(xì)胞、H4細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞
Kit 225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
LICR-LON-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞
HCC941122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1963細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、H-1793細(xì)胞
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