"MDA-MB-468 Thawing人乳腺癌細胞系
細胞背景資料:該細胞是1977年由CailleauR等從一位患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合,但此細胞株始終表現(xiàn)為G6PDA表型。P53基因273位密碼子存在G→A突變,從而導致Arg→His替代。每個細胞上存在1×106個EGF受體。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
MDA-MB-468 Thawing人乳腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;2-3天換液1次
預防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網(wǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDA-MB-468 Thawing人乳腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié),這里說一些我個人的經(jīng)驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入,僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經(jīng)驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經(jīng)驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質(zhì)量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
Normal fibroblast-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細胞、PNT1A細胞、JVM-2細胞
KP 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Saos2細胞、D341Med細胞、CCD 19Lu細胞
CX1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH7777細胞、SW 1417細胞、H-716細胞
RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞
NCI-H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
EVSAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞
GM00637B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neukoplast細胞、L-M(TK-)細胞、alphaTC1 Clone 6細胞
NCIH244細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、RCC10 RGB細胞、RSMC細胞
SU8686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL3A細胞、CHP 126細胞、HBL 100細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
PC615.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
KU19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞
PT-K75細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞
G-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞
G-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞
KMY1022細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞
MDA 435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
TK-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞
IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
MDA-MB-468 Thawing人乳腺癌細胞系
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
KP-N-NS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞
BT 325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞
COLO 824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
H-716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞
MES-SA/Dx-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞
D-341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
YD-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞
NCI-H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
SKMEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
KOPN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞
Hs832.Tc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞
DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
N-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
HCC-4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU869細胞、H-841細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞
NPA87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞
SK-MEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283MED細胞、MDA-MB231細胞、PaTu 8988s細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞
Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
MDA-MB-468-RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞
NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞
GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
U266 B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
MDA-MB-468 Thawing人乳腺癌細胞系
MFE-296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
GM03671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞
M619細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細胞、PC-10細胞、UM-RC-2細胞
UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞
H-810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞
H-1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞
KCL-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞
H-847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
Kato-III細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
CAL 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞
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