"SH-SY5Y Thawing人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:據(jù)報(bào)道,該細(xì)胞的密度可高達(dá)1×106cells/cm2,具有中等水平的多巴胺β羥化酶的活性。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
SH-SY5Y Thawing人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題,究竟是什么原因?qū)е?,我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決?以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,總結(jié)的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解,推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升;2)解凍過(guò)程中的問(wèn)題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時(shí)間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng);3)對(duì)冷凍液過(guò)敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期;4)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng),存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周?chē)?,然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SH-SY5Y Thawing人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn),比如病毒包裝,對(duì)細(xì)胞代數(shù),對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候,胰酶消化,就是潤(rùn)洗,都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過(guò)影響ECM相關(guān)酶的活性,來(lái)使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過(guò)螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見(jiàn)的操作,因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問(wèn)可以講,對(duì)于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
COS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4C細(xì)胞、H-2172細(xì)胞、CL-34細(xì)胞
TEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.CL2細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞、LM3細(xì)胞
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞
WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
SHG 44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
MTC-TT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC11細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞
HIEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04679細(xì)胞、SW1573細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
MeSoTheliOma-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞
Ramos細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL51細(xì)胞、PC-9細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞
HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞
RGM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1R細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
NCI-SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、HOPC細(xì)胞
UT7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG01細(xì)胞、TE-671細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
Panc-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC3細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞
NCIH548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞
NCIH548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞
P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞
WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞
MHCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0095細(xì)胞、H2110細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞
BALB/3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-ori細(xì)胞、RC-2細(xì)胞、LS-174細(xì)胞
SH-SY5Y Thawing人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
Colo-201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 MI細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞
SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞
H-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143BTK-細(xì)胞、LN 229細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞
PIG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 29細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞
LU451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82 COT細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞
231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞
CAL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1846細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、F-81細(xì)胞
H-1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-1細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞
COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞
MODE-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞、H-69細(xì)胞
NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞
HOP62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞
LAPC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSAT細(xì)胞、SNU886細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞
KYSE 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞
LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞
UCLA-SO-M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92MI細(xì)胞、STO細(xì)胞、MV-3細(xì)胞
SKNBE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17細(xì)胞、ECV細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞
SkChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT93細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞、H-211細(xì)胞
SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞
RPMI no 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH82細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞、ARH77細(xì)胞
HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞
P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞
GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaEs17細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞、MB-49細(xì)胞
HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞
HEK-293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:201T細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞、STO細(xì)胞
G401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞
TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞
KU 812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226S細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞
TE 32.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 767細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞、C1498細(xì)胞
NCI-H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-8細(xì)胞、HCT116細(xì)胞、Fao細(xì)胞
P3-Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-NFS-60細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞
T-HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBI-HEK 293A細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞、MDA134細(xì)胞
H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞
SH-SY5Y Thawing人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
V79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN5細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞
Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞
NCIH345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 738細(xì)胞、MT4細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞
CCRF SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1355細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞、A101D細(xì)胞
HuPT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞
CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞
KOPN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 94細(xì)胞、OE-19細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞
BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kupffer細(xì)胞、Y1細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞
SRS-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC-1細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞
LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞
U87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞、C33-A細(xì)胞
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