"HCC827 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:這株細胞建于1994年三月。這株肺腺癌在EGFR酪酸激酶區(qū)域有一個獲得性突變(E746-A750缺失)。患者在25歲到26歲時每個月抽1包煙。在診斷前12年不再抽煙。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HCC827 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長:貼壁
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞特點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞的教訓:不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化5分鐘。1:2。4-5天長滿。
傳代的操作步驟注意事項:1)操作前要洗手,進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈,操作在火焰附近進行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動,增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮,細胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后,把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟:1)吸出細胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC827 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
OCI-LY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
NCI-H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
P30OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
GM02219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
H-2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞
HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
NCI-SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞
HO1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞
OP-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB-106細胞、PTK-1細胞、FOX-NY細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV2008細胞、HCC1395細胞、NBL-4細胞
SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
MA 104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞
HCC827 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
KCL22S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞
L cells (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
WM-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞
HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
S180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
TC-1[JHU-1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
Hs 852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
Anip[973]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞
DrG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
UCLA SO M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞
HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞
HIT.T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞
Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
HCC44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞
P3-X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞
NB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHC-ST1細胞、U-251 MG細胞、NCI-H1869細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
LLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly7細胞、NCI-H1755細胞、C-28I2細胞
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
HCC827 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞
TU 686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
HARA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞
HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
BC-009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
LC-1Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
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