"HCC827 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：這株細胞建于１９９４年三月。這株肺腺癌在EGFR酪酸激酶區(qū)域有一個獲得性突變(E７４６-A７５０缺失)。患者在２５歲到２６歲時每個月抽１包煙。在診斷前１２年不再抽煙。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HCC827 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
養(yǎng)了幾年細胞，說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法：１)培養(yǎng)細胞前，可以看看細胞特點說明書，包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細胞，就得細心呵護了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況；４)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細胞的教訓：不能偷懶!細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。１)不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化５分鐘。１：２。４-５天長滿。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC827 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
OCI-LY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
NCI-H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
P30OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
GM02219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
H-2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞
HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
NCI-SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞
HO1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞
OP-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB-106細胞、PTK-1細胞、FOX-NY細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細胞、HCC1395細胞、NBL-4細胞
SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
MA 104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞
HCC827 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
KCL22S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞
L cells (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
WM-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞
HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
S180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
TC-1[JHU-1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
Hs 852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
Anip[973]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞
DrG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
UCLA SO M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞
HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞
HIT.T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞
Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
HCC44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞
P3-X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞
NB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHC-ST1細胞、U-251 MG細胞、NCI-H1869細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
LLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly7細胞、NCI-H1755細胞、C-28I2細胞
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
HCC827 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞
TU 686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
HARA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞
HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
BC-009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
LC-1Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
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