"HCCC-9810 Thawing人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：HCCC-９８１０細(xì)胞株源自一位女性肝膽管細(xì)胞癌患者。 HCCC-９８１０細(xì)胞呈上皮細(xì)胞樣，染色體模式數(shù)為７１，但染色體數(shù)目可以在２２-１１７的范圍內(nèi)變動(dòng)。倍增時(shí)間為２０.４小時(shí)。 AFP，CEA和CA１９-９的分泌水平低，在裸鼠中的成瘤率為２０%。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HCCC-9810 Thawing人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCCC-9810 Thawing人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時(shí)候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮鳎傆X得自己沒有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
Sp2/0-Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1404細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
MKN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK2細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞、Ly3細(xì)胞
Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞
HSC-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細(xì)胞、Co 205細(xì)胞、HKC細(xì)胞
LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞
SK Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 5細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞、SW-579細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
DrG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞
BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞
H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞
HCoEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P36細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞
PK(15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW403細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞、BGC823細(xì)胞
Wien133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-CL-11細(xì)胞、BALL1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞
SJCRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、TM3細(xì)胞
DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細(xì)胞、H1869細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞
NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞
HBE 135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞
F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞
CEMx721.174.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞
HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
HCCC-9810 Thawing人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系
OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
KP-N-NS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV 1細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞
RPMI-1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞
A101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2B細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞
PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22Rv1細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞
H-1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH77細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞、THLE-3細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
MGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 115細(xì)胞、Hs675細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞
TE 32.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 767細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞、C1498細(xì)胞
LICR-LON-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞
NTera2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu8988s細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞、CoC1細(xì)胞
H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN-8細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞
HEC251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-0細(xì)胞、IHH4細(xì)胞、MDA453細(xì)胞
BT 325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP-37細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞
174xCEM.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H446細(xì)胞、GA10細(xì)胞、H-460細(xì)胞
CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞
JCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞
BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
MCA38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-hth74細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞
HR-8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞
R2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、SW-620細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞
H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞
CHO-Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8402細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞、C 643細(xì)胞
AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞
SKMES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞
MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞
ML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細(xì)胞、H2452細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
AtT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1436細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、A-253細(xì)胞
HCCC-9810 Thawing人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞系
HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG7701細(xì)胞、HOP62細(xì)胞、THPI細(xì)胞
Douglas Foster-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞
LS-411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞
H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1882細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞
SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞
CAMA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞、WERI細(xì)胞
H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞
DMS153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-9細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞
Sci-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip-973細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞
SCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細(xì)胞、TE7細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞
C-4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan2細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞
"