"HT-29 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞是1964年由FoghJ用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的。近來(lái),已建株的培養(yǎng)細(xì)胞用含血清的McCoy's5a培養(yǎng)基培養(yǎng)。該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤,也能在類固醇處理的地鼠中成瘤。該細(xì)胞可合成IgA、CEA、TGFβ結(jié)合蛋白和黏液素;表達(dá)尿激酶受體,但沒(méi)有檢測(cè)到血漿酶原活性;不表達(dá)CD4,但細(xì)胞表面表達(dá)半乳糖神經(jīng)酰胺(HIV的可能替代受體)。該細(xì)胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽(yáng)性;p53基因過(guò)表達(dá),并且在273位密碼子處發(fā)
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
HT-29 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
養(yǎng)了幾年細(xì)胞,說(shuō)一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法:1)培養(yǎng)細(xì)胞前,可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說(shuō)明書,包括細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同,有的生長(zhǎng)很快,比如說(shuō)MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿,所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索了;3)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)了,胰酶消化不能過(guò)久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間,每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況;4)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn):不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。1)不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測(cè)是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢,買個(gè)支原體檢測(cè)的kit定期檢測(cè)一下;3)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個(gè)人衛(wèi)生。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解:1)收到細(xì)胞,首先要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T,平時(shí)貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會(huì)發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的,通過(guò)離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí),進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí),則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下,會(huì)調(diào)整為靜止期,或者慢速生長(zhǎng)期,恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右,才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài),在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶;對(duì)于生長(zhǎng)較慢,細(xì)胞比較薄,狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型,一次少傳些,每瓶細(xì)胞密度大些,便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞,次處理也可以依照第二種情況。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HT-29 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞凍存知識(shí)普及:細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái),這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷。 采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1到-2℃/min,當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
HET-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3190細(xì)胞、Caco2-BBE細(xì)胞、LX-2細(xì)胞
NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞
HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞
AMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞、VP303細(xì)胞
SU 86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞
QGP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞
HCT116/L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 1005細(xì)胞、LAC細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞
RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞
HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞
EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞
H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 2008細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
HOP62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞
MOLP-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞、C-26細(xì)胞
SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-2細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞
NCIH1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC5細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞、HRA19細(xì)胞
MMAc-SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEB細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞、MB157細(xì)胞
38C13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
CCD1112Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1RGB細(xì)胞、BL6細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞
CCD1112Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1RGB細(xì)胞、BL6細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞
H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞
SVEC 4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-711細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞
Hs 606.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細(xì)胞、TM3細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞
IGROV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞
HT-29 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞
NCIH69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD 2細(xì)胞、H-1963細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞
SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞
WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞
WM239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-IE8細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
MRASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞
DITNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES-1細(xì)胞、LU165細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞
NCI-H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞、H774細(xì)胞
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞
KNS-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388D1細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞、T47-D細(xì)胞
CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞
KP4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS653細(xì)胞、F9細(xì)胞、VP229細(xì)胞
Hu-P-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV362細(xì)胞、697細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞
SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞
Hep 3B2.1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞、BT-325細(xì)胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG7701細(xì)胞、HOP62細(xì)胞、THPI細(xì)胞
SKUT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5 B1-4細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、HepG2細(xì)胞
3T6 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283-MED細(xì)胞、NCI H23細(xì)胞、TI-73細(xì)胞
NK62a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞
AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞
H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
HEC-151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2-luc細(xì)胞、H358細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞
MUTZ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞
CCLP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞
Tb1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA47細(xì)胞、H-1869細(xì)胞、L363細(xì)胞
CWR22R-V1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-SRA-01/04細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV-neo細(xì)胞、H2023細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞
HPDLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2935細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞
H-2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞
HT-29 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM1900細(xì)胞、MES 13細(xì)胞、769P細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-738細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞、H-2452細(xì)胞
DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞
CHL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-03.27細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞
Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3F442A細(xì)胞、A-549細(xì)胞、G401細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
3T3F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Microbiological Associates-104細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞、NWA細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
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