"CCD-33Co Adherent人結(jié)腸成纖維細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
CCD-33Co Adherent人結(jié)腸成纖維細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
MGH-U1 (EJ)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞
16HBEo-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
BEL7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Tu177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
IALM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
CCD-33Co Adherent人結(jié)腸成纖維細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
傳代細胞培養(yǎng)注意事項：１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：瘤細胞懸液接種１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml/部位，＞１０(６)細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種：將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下：１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１×１０(６)腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７-１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> NCTC 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞
LA-N-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
GM05887細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞
BNL CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
PC-3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
Huh-7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞
UCLA-SO-M20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2935細胞、Henrietta Lacks cells細胞、BC-3H-1細胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
KM.12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
BALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞
Monomac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
CCD-33Co Adherent人結(jié)腸成纖維細胞系
DR2R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞
NIH/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞
NIH/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞
OVCAR 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
HCET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞
SNU16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL39細胞、FL 62891細胞、RIN14B細胞
BHP10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞
KM12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞
HT 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞
2PK3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
TE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞
CEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞
T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
SMMC7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞
SK.MEL.28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞
P31 FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
Dunn LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞
ARO 81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
TE 354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞
TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
A-172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞
NRK clone 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
H-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143BTK-細胞、LN 229細胞、hADSCs細胞
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
MO59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
HCC94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
FHs74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
NCIH2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞
3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
CCD-33Co Adherent人結(jié)腸成纖維細胞系
HOS (TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
IM95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
HSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞
KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
MLMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266細胞、GDM-1細胞、HuT-78細胞
HCFB（HCF）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
HUASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HaCaT細胞、P 815細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
U266B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV433細胞、PC14細胞、HSC3細胞
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、H774細胞、WI38細胞
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