"3T3-J2 Adherent小鼠胚胎成纖維細胞系
細胞背景資料：胚胎；成纖維細胞
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
3T3-J2 Adherent小鼠胚胎成纖維細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
RAW264.7細胞系相關產(chǎn)品：SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
T/GHA-VSMC細胞系相關產(chǎn)品：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞
P560細胞系相關產(chǎn)品：HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
VAESBJ細胞系相關產(chǎn)品：ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
ML2細胞系相關產(chǎn)品：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
PASMCS細胞系相關產(chǎn)品：138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
細胞生長特性：貼壁
3T3-J2 Adherent小鼠胚胎成纖維細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
傳代細胞培養(yǎng)注意事項：１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：瘤細胞懸液接種１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml/部位，＞１０(６)細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種：將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下：１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１×１０(６)腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７-１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關產(chǎn)品：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞
hFOB1.19細胞系相關產(chǎn)品：Helacyton gartleri細胞、IPLB-SF 21細胞、Ramos細胞
NCI-H226細胞系相關產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞系相關產(chǎn)品：Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞
HIMEC細胞系相關產(chǎn)品：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
SK MES 1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR.3細胞、D-283MED細胞、LNCaP C4-2細胞
H-2170細胞系相關產(chǎn)品：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
MH-S細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
H650細胞系相關產(chǎn)品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
SW-403細胞系相關產(chǎn)品：TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
OCUM-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-157細胞、NCI-H1666細胞、HEK (AD293)細胞
BC-3H-1細胞系相關產(chǎn)品：H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞
H-125細胞系相關產(chǎn)品：U937細胞、MV4II細胞、P388細胞
3T3-J2 Adherent小鼠胚胎成纖維細胞系
SCC154細胞系相關產(chǎn)品：Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞
Tn-5細胞系相關產(chǎn)品：MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關產(chǎn)品：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關產(chǎn)品：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
PC10細胞系相關產(chǎn)品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
NRK49F細胞系相關產(chǎn)品：SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
RPMI2650細胞系相關產(chǎn)品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
MLM細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞
P3JHR1細胞系相關產(chǎn)品：CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞
LA-795細胞系相關產(chǎn)品：NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
SW 839細胞系相關產(chǎn)品：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
FHL-124細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
CHO-S細胞系相關產(chǎn)品：OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
WI 38細胞系相關產(chǎn)品：GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
SKG3A細胞系相關產(chǎn)品：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
H4-IIE-C3細胞系相關產(chǎn)品：CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
NCI-HUT-292細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
NG10815細胞系相關產(chǎn)品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
3T3細胞系相關產(chǎn)品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
HSF2細胞系相關產(chǎn)品：ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
EJ1細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL2細胞、OVCA 433細胞、SW-1463細胞
Sp2/O-Ag14細胞系相關產(chǎn)品：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞
HVSMC細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞
CCD-19Lu細胞系相關產(chǎn)品：HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關產(chǎn)品：ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
CAMA1細胞系相關產(chǎn)品：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
MBMEC細胞系相關產(chǎn)品：CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
Ca761細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
NBL-7細胞系相關產(chǎn)品：KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞
SF-539細胞系相關產(chǎn)品：SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
NCIH28細胞系相關產(chǎn)品：SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
H2.35細胞系相關產(chǎn)品：LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞
SNU-719細胞系相關產(chǎn)品：HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
HFLS-RA細胞系相關產(chǎn)品：Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞
NCIH2122細胞系相關產(chǎn)品：LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
293S細胞系相關產(chǎn)品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
MDA PCa 2b細胞系相關產(chǎn)品：COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
SSP-25細胞系相關產(chǎn)品：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
HO-8910 PM細胞系相關產(chǎn)品：CL-40細胞、H-2227細胞、NCI-H345細胞
3T3-J2 Adherent小鼠胚胎成纖維細胞系
NCI-H1048細胞系相關產(chǎn)品：TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
H1155細胞系相關產(chǎn)品：HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
COLO 679細胞系相關產(chǎn)品：CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞
SK-N-BE(1)細胞系相關產(chǎn)品：AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞
WC00059細胞系相關產(chǎn)品：GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
H-441細胞系相關產(chǎn)品：769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞
LS-513細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
JVM-2細胞系相關產(chǎn)品：3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞
AtT20細胞系相關產(chǎn)品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
Mel-RM細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB436細胞、HN6細胞、A-204細胞
Namalva細胞系相關產(chǎn)品：Nakata-1細胞、MDA231-LM2細胞、HCC1419細胞
NCI-H226細胞系相關產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、ZR-75-30細胞、CNE細胞
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