"HMO6 Adherent人小膠質細胞系
細胞背景資料：小膠質細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HMO6 Adherent人小膠質細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
MUS-M1細胞系相關產(chǎn)品：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
Panc02.03細胞系相關產(chǎn)品：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
NG10815細胞系相關產(chǎn)品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI H23細胞系相關產(chǎn)品：H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
MEL細胞系相關產(chǎn)品：RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
THLE-3細胞系相關產(chǎn)品：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
細胞生長特性：貼壁
HMO6 Adherent人小膠質細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
SU-86-86細胞系相關產(chǎn)品：HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
SKNBE-2細胞系相關產(chǎn)品：Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
AtT20細胞系相關產(chǎn)品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
MPP 89細胞系相關產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
MDA-MB-330細胞系相關產(chǎn)品：U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞
MDA-157細胞系相關產(chǎn)品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞
A 72細胞系相關產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
H8細胞系相關產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
HASMC細胞系相關產(chǎn)品：HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關產(chǎn)品：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
H1563細胞系相關產(chǎn)品：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
TEC細胞系相關產(chǎn)品：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
HMO6 Adherent人小膠質細胞系
TK-1細胞系相關產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
UMNSAH/DF-1細胞系相關產(chǎn)品：NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞
CEM-T4細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
CEM-T4細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
C32 mel細胞系相關產(chǎn)品：MESSA-DX5細胞、C1R細胞、NGEC細胞
MBVP細胞系相關產(chǎn)品：COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
GM00346細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關產(chǎn)品：U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
IEC6細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞
KAT5細胞系相關產(chǎn)品：HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞
NCIH838細胞系相關產(chǎn)品：MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
SCC090細胞系相關產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
Mevo細胞系相關產(chǎn)品：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
KLN 205細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-175細胞、COLO357細胞、Hep3B細胞
SUP-B1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
MV522細胞系相關產(chǎn)品：PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
CL-40細胞系相關產(chǎn)品：HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞
SNU-739細胞系相關產(chǎn)品：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
SUM190細胞系相關產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
HO1N1細胞系相關產(chǎn)品：Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞
MF2059細胞系相關產(chǎn)品：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
HuPT4細胞系相關產(chǎn)品：MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞
NB-4細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞
SuDHL 2細胞系相關產(chǎn)品：DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞
D 407細胞系相關產(chǎn)品：HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞
hOMF細胞系相關產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
MonoMac 6細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
TSCCa細胞系相關產(chǎn)品：UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞
VK2 (E6/E7)細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞
BAEC細胞系相關產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
MOPC細胞系相關產(chǎn)品：HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
NCIH2029細胞系相關產(chǎn)品：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
MV-4-11細胞系相關產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
Tj-905細胞系相關產(chǎn)品：GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
Fox/NY細胞系相關產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
N-9細胞系相關產(chǎn)品：PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
Y3-Ag123細胞系相關產(chǎn)品：C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
Karpas422細胞系相關產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
HCC1806細胞系相關產(chǎn)品：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
NCI-H2023細胞系相關產(chǎn)品：G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
H647ell細胞系相關產(chǎn)品：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
MB157細胞系相關產(chǎn)品：SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞
HMO6 Adherent人小膠質細胞系
NG108-15細胞系相關產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
SNU-668細胞系相關產(chǎn)品：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞
CHP126細胞系相關產(chǎn)品：HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞
COLO-699細胞系相關產(chǎn)品：LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
HS-294-T細胞系相關產(chǎn)品：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
N1E115細胞系相關產(chǎn)品：ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
H-1963細胞系相關產(chǎn)品：CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞
WEHI-231細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞
Panc 02細胞系相關產(chǎn)品：T47-D細胞、Hs675T細胞、Pan02細胞
3T3NIH細胞系相關產(chǎn)品：LX-2細胞、WEHI-3細胞、GA10細胞
hFOB 1.19細胞系相關產(chǎn)品：HTR8細胞、N2a細胞、YAC-1細胞
AtT20細胞系相關產(chǎn)品：U138MG細胞、Emory University-3細胞、RT112細胞
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