"Sol8 Adherent小鼠骨骼肌肌肉母細胞系
細胞背景資料:骨骼??;C3H
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Sol8 Adherent小鼠骨骼肌肌肉母細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應立即停用,更換另一批號的血清。
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞
NCI-N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Leukemia 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞
Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
細胞生長特性:貼壁
Sol8 Adherent小鼠骨骼肌肌肉母細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
H-345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞
OCI-Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞
GM3569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
LLCMK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞
U20S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞
H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
UMUC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
SKMES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
KALS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
KM.12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
Sol8 Adherent小鼠骨骼肌肌肉母細胞系
H-1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
AKR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞
AKR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞
SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
IGR-OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
SK ES 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
SK-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞
BetaTC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞
NCIH1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
TE10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79-4細胞、GM12878細胞、MPC5細胞
hA549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
HCC78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
Plaepi 34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
SHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx-2細胞、LU451細胞、CWR22-Rv1細胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H128細胞、HASMC細胞、NCI-H1299細胞
HCC941122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
LM TK negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞
COLO320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞
rRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
hEM15A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
BHT-101細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞
Jurkat-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞
NCI-SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
NCI H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞
K 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
201T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞
RPE1-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞
HPB/ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞
TE-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
U87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
U87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
Sol8 Adherent小鼠骨骼肌肌肉母細胞系
IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
IR983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
BEL-7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞
LICR-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞
KPL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞
BT-325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
COV434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRS-82細胞、HT 1197.T細胞、SUM190細胞
BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、RAOEC細胞
GM-346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVHM細胞、DSL-6A/C1細胞、hTERT RPE-1細胞
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