"TE-13 Adherent人食管癌細胞系
細胞背景資料:食管鱗癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數活細胞數,用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TE-13 Adherent人食管癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內,依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
H1522細胞系相關產品:Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
H2291細胞系相關產品:RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞
MC116細胞系相關產品:Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
AE1201細胞系相關產品:COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞
AE1201細胞系相關產品:COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞
H-2087細胞系相關產品:PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
細胞生長特性:貼壁
TE-13 Adherent人食管癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數據上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸的過程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
CL MC/9細胞系相關產品:HFL 1細胞、Walker256-TC細胞、NOR-10細胞
NCIH929細胞系相關產品:U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
SJSA細胞系相關產品:CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
LIM1215細胞系相關產品:HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞
TK.10細胞系相關產品:HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞
MASMC細胞系相關產品:MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
MC116細胞系相關產品:Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
NCIH460細胞系相關產品:Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
CHL-IU細胞系相關產品:KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
H-548細胞系相關產品:HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞
DU 145細胞系相關產品:Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
22Rv1細胞系相關產品:MDA.MB.231細胞、GM04680細胞、UT-7細胞
IGROV細胞系相關產品:HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
TE-13 Adherent人食管癌細胞系
NCIH1930細胞系相關產品:Hs888Lu細胞、LLC1細胞、NCI-H676細胞
2B4細胞系相關產品:MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞
Be-Wo細胞系相關產品:BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
Be-Wo細胞系相關產品:BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
L 428細胞系相關產品:SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞
Ketr-3細胞系相關產品:C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
GES1細胞系相關產品:HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
RKO-E6細胞系相關產品:RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞
UCH1細胞系相關產品:HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
IB-RS-2細胞系相關產品:CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞
DMS 79細胞系相關產品:SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
U 937細胞系相關產品:EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞
H-1793細胞系相關產品:ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
HEL-1細胞系相關產品:SCC 4細胞、Adeno-293細胞、H2052細胞
CTV1細胞系相關產品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
OVCAR-5細胞系相關產品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
P-3J細胞系相關產品:TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
SK-LU-1細胞系相關產品:OCI-Ly 3細胞、LN 382細胞、211H細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關產品:COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
RD細胞系相關產品:MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
A-375.S2細胞系相關產品:LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
UCLA-SO-M21細胞系相關產品:NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞
MCF7-CTRL細胞系相關產品:SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
SNU423細胞系相關產品:OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞
HITT15細胞系相關產品:CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞
VCaP細胞系相關產品:Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
PATU-S細胞系相關產品:SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
Clone Y-1細胞系相關產品:C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
Swiss 3T6細胞系相關產品:GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞
GalK1細胞系相關產品:CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
SKMel-5細胞系相關產品:WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞
P-2003細胞系相關產品:SCC 15細胞、TYK-nu細胞、HSAS4細胞
HuH-1細胞系相關產品:NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
P3-Jiyoye細胞系相關產品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
H146細胞系相關產品:NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
MCF.10A細胞系相關產品:HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
Walker256細胞系相關產品:NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
Walker256細胞系相關產品:NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
HOCF細胞系相關產品:Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞
BE2-M17細胞系相關產品:COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞
SW-626細胞系相關產品:Malme-3 M細胞、TALL 1細胞、SK-N-BE(2)細胞
SF-126細胞系相關產品:HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
TE-13 Adherent人食管癌細胞系
H-747細胞系相關產品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
SMC-1細胞系相關產品:GM07404A細胞、FRTL5細胞、Caki-2細胞
766T細胞系相關產品:EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
LTEPa2細胞系相關產品:SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
SUNE1細胞系相關產品:GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
SK-MEL5細胞系相關產品:HemECs細胞、HUT-28細胞、SW 403細胞
H-295R細胞系相關產品:SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
SHZ-88細胞系相關產品:PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
NP69細胞系相關產品:H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
Tu-686細胞系相關產品:HEK-AD 293細胞、HEM細胞、P30-OHKUBO細胞
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關產品:NCI-H740細胞、MCF-7ADR細胞、Liver-02細胞
SJSA細胞系相關產品:CAL 12T細胞、SUD4細胞、TE-10細胞
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