"CMT93 Adherent小鼠結(jié)腸癌細胞系
細胞背景資料：結(jié)腸癌；C５７BL/ICRF
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
CMT93 Adherent小鼠結(jié)腸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴(yán)重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
OCILY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
NHLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
SW 1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞
HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
細胞生長特性：貼壁
CMT93 Adherent小鼠結(jié)腸癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
VP229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
CFSC-2G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
LA-N-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞
118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞
LLC PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20S細胞、LTEP-s細胞、JTC-28細胞
HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞
Jurkat E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞
NCI-H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞
32D clone 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A875細胞、MDA231-LM2細胞、N-9細胞
VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
GA-10-Clone-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞
CMT93 Adherent小鼠結(jié)腸癌細胞系
HBL100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
Huh-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
Huh-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
MRC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-1細胞、DSL6A/C1細胞、PCI-4B細胞
NCIH345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞
SW 403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
SK BR 03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞
SKO-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
SNU-869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
Sol8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
U343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞
CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
UWB1-289細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞
KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
Hs852細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞
IM-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞
QGY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
CAL 51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
MIN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞
Hs578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
U20-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞
MT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
JB-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細胞、NCIH740細胞、COLO 824細胞
COC1/CDDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
PANC 1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞
NOMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞
MKN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
LA 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
SCLC-21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
SHP77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞
Hs 578.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
VeroE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
SKLMS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞
TOV-112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
OCI-LY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
CMT93 Adherent小鼠結(jié)腸癌細胞系
TM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞
HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
HCC78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
CD18/HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-9細胞、RL95-2細胞、Chinese Hamster Lung細胞
hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 45細胞、M619細胞、BT325細胞
COLO-320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細胞、PA12細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
CFSC-2G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2405細胞、CAL12T細胞、TE-7細胞
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