"LA-N-5 Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：神經(jīng)母細胞瘤；骨髓轉移；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
LA-N-5 Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
H-1963細胞系相關產(chǎn)品：CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞
Tb1Lu細胞系相關產(chǎn)品：J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞
A2780/CP70細胞系相關產(chǎn)品：A-375SM細胞、SNU-16細胞、alpha TC1-6細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LUDLU 1細胞系相關產(chǎn)品：HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
SW1353細胞系相關產(chǎn)品：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
K7M2-WT細胞系相關產(chǎn)品：SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
細胞生長特性：貼壁
LA-N-5 Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
4T1.2細胞系相關產(chǎn)品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
GM03320細胞系相關產(chǎn)品：SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
RT-112細胞系相關產(chǎn)品：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
K7M2 wt細胞系相關產(chǎn)品：Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
SW 1990細胞系相關產(chǎn)品：MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
SUDHL8細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
C127細胞系相關產(chǎn)品：M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
MIO-M1細胞系相關產(chǎn)品：PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞
WI38細胞系相關產(chǎn)品：NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
AR4-2J細胞系相關產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
FHL 124細胞系相關產(chǎn)品：38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
V79細胞系相關產(chǎn)品：MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
HEL 92.1.7細胞系相關產(chǎn)品：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
LA-N-5 Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
NCI747細胞系相關產(chǎn)品：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
WSU-HN13細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞
SK HEP-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
SK HEP-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
MFD-1細胞系相關產(chǎn)品：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
H520細胞系相關產(chǎn)品：EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
NCIH1563細胞系相關產(chǎn)品：GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
Mink細胞系相關產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
NCIH1963細胞系相關產(chǎn)品：C1498細胞、NR-8383細胞、ES2細胞
A-375細胞系相關產(chǎn)品：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
NB9細胞系相關產(chǎn)品：WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞
SUIT-2細胞系相關產(chǎn)品：K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞
NCI-H1618細胞系相關產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
OSC-19細胞系相關產(chǎn)品：BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞
NCIH211細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
B16-F10-BL6細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
mREC細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
OCI-LY-8細胞系相關產(chǎn)品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
BCECs細胞系相關產(chǎn)品：PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞
H-1404細胞系相關產(chǎn)品：RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞
BXPC3細胞系相關產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關產(chǎn)品：HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞
GM03570E細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-2細胞、WM-239A細胞、Lu-165細胞
Henrietta Lacks cells細胞系相關產(chǎn)品：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞
SK-OV-433細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
SL1細胞系相關產(chǎn)品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
SupT1細胞系相關產(chǎn)品：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
EOL1細胞系相關產(chǎn)品：H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
ME180細胞系相關產(chǎn)品：PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
HLF細胞系相關產(chǎn)品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
SKUT-1細胞系相關產(chǎn)品：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
hTERT-HME-1細胞系相關產(chǎn)品：293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞
MN60細胞系相關產(chǎn)品：COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
UMNSAH/DF-1細胞系相關產(chǎn)品：NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞
NCTC-929細胞系相關產(chǎn)品：SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
H-548細胞系相關產(chǎn)品：HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞
N87細胞系相關產(chǎn)品：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
Tca8113細胞系相關產(chǎn)品：Hs 695T細胞、SUDHL-5細胞、Tu-212細胞
YD-15細胞系相關產(chǎn)品：Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞
Swiss3T3細胞系相關產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
LA-N-5 Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
MDAMB415細胞系相關產(chǎn)品：293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞
HIBEpiC細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
RWPE2細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞
NCIH2452細胞系相關產(chǎn)品：B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
NCI H157細胞系相關產(chǎn)品：Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞
NCI-H2141細胞系相關產(chǎn)品：KTA-7細胞、Ca9-22細胞、BIC-1細胞
CMT-64細胞系相關產(chǎn)品：GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
Hos TE-85細胞系相關產(chǎn)品：MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞
NE-1細胞系相關產(chǎn)品：159 PT細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、COV 434細胞
C3H/10T1/2 CL8細胞系相關產(chǎn)品：MT4細胞、SCCVII/St細胞、MHCC97細胞
RT-112細胞系相關產(chǎn)品：C32-mel細胞、T47D:A細胞、A-875細胞
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