"HCS-2/8 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：軟骨肉瘤；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCS-2/8 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
KYSE410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
HSC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCIH1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
Mo7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞
細胞生長特性：貼壁
HCS-2/8 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
hSCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞
THPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞
MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
HT1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
EBNA-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞
EB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞
CNE2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞
CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
EFM-192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞
SKLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
HCS-2/8 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
OCI/AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
OCI/AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
H-596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-661細胞、CAL62細胞、Tb1Lu細胞
NCI-H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞
FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
NeHepLxHT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞
HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
HUT 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
A.704細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
UPCISCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
VSC4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
SNU182細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
EC-GI-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
MDA468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
H82sclc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
OCI-Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞
HEK293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-7951細胞、H920細胞、Tn-5B1-4細胞
SPC-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
SHG 44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞
H-1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞
U14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
HCC1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
MDA MB 134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
HCC0827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞
MPC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
F98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞
HFLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
CMK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞
OVCAR.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES-1細胞、LOU-NH91細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
L 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞
HCS-2/8 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
293/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞
Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞
Mono Mac 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞
H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞
SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
Leukemia L1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞
PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-LM3細胞、Anglne細胞、NCI-SNU-620細胞
OV-CA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM-1細胞、NCI-H125細胞、WB F344細胞
MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細胞、SU 86.86細胞、HEK-293FT細胞
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