"RBE4 Adherent大鼠腦血管內(nèi)皮細胞系
細胞背景資料：２型腺病毒轉(zhuǎn)化；SD大鼠
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RBE4 Adherent大鼠腦血管內(nèi)皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
LK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
CT26WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞
GM15452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
A9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1688細胞、H-1573細胞、A-10細胞
細胞生長特性：貼壁
RBE4 Adherent大鼠腦血管內(nèi)皮細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
RCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞
M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞
TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
HCC-1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
EAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
KCL22S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞
P30 OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞
SupB15WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞
HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
SK-Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞
MLMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
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Wien133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞
EoL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞
UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
MHHCALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
MDA MB 436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266-B1細胞、EAC-E2G8細胞、KM12-SM細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
MGH-U1 (EJ)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞
GM17219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞
SNK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
OCI-Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
HS-695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞
AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
MDA-kb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-699細胞、ketr 3細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞
293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞
BetaTC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞
RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
PLB-985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
526-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
HCC-1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
CL34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
C-4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞
MOLM-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞
PASMCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞
B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞
R.K.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞
SKMES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞
hSCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞
NCIH889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
MeT5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML5細胞、H2066細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞
SW480E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
SW480E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
RL-95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
RBE4 Adherent大鼠腦血管內(nèi)皮細胞系
MCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHG5細胞、GES-1細胞、L132細胞
NCI-SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
Jurkat E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
NCI H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞
DU-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRGEC細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、Hx-147細胞
H-510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
C-4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMF細胞、KLN 205細胞、SW-579細胞
NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細胞、H735細胞、HCC1438細胞
M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-2細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、A375-SM細胞
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