"FRTL-5 Adherent大鼠甲狀腺細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：甲狀腺；自發(fā)永生；Fischer
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
FRTL-5 Adherent大鼠甲狀腺細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞
OP9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU354細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞
NCI-H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞
H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞
RN-c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-1細(xì)胞、X63細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
FRTL-5 Adherent大鼠甲狀腺細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
G-292 clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB2細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞、LLC1細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
SNU620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞
MDA-MB-435-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞
SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞
MC3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞
TALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞
SUDHL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92-MI細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞
H-889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞
COR L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞
TE-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞、H2291細(xì)胞
WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞
FRTL-5 Adherent大鼠甲狀腺細(xì)胞系
U266B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV433細(xì)胞、EO771細(xì)胞、OV1063細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞
MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞
MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞
HECCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K422細(xì)胞、OK細(xì)胞、H-1694細(xì)胞
H-748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
NFS 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞
OCI/AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞、HC11細(xì)胞
KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞
MDA231-LM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細(xì)胞、MA-782細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞
OCI-LY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC-1細(xì)胞、SKml2細(xì)胞、HIT細(xì)胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04671細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞、CW2細(xì)胞
Raji細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VAESBJ細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞
SW-480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H78細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞
RERF-LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1882細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞
VM-CUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞、SW-948細(xì)胞
WM451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB 17細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞
2PK3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T6細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞
HCC-827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7B細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞、SW 527細(xì)胞
B16/F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/ag細(xì)胞、SW-839細(xì)胞、ATN1細(xì)胞
NCIH1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
LC-1-sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH35細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞
Lieming Xu-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC細(xì)胞、H810細(xì)胞、U251n細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
DHBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞
C8D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1930細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞
Caco-2/BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW620細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞
KHYG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates 1B細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞、H2172細(xì)胞
Hela-mock細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞
RPMI 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞
PLA-802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細(xì)胞、H1930細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞
WSU-DLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞
HLF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW01細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞
RAMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H920細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞、A3細(xì)胞
HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/CAR細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞、HuH6細(xì)胞
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
TM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRCEC細(xì)胞、NS653細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞
FRTL-5 Adherent大鼠甲狀腺細(xì)胞系
SVGp12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2066細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞、TE354T細(xì)胞
OCIAML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞
OSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN3細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞
Fox/NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞
OV2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞
Hs688(A)T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266-4細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞
OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞
BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞
SF 767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSUpr1細(xì)胞、ESC細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞
AR42J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L88細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞
GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞、GM3190細(xì)胞
"