"U-118MG epithelioid cells人腦星形膠質母細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
H7721細胞系相關產品：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
NCI-H2110細胞系相關產品：E6-1細胞、G-292 clone A141B1細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞
CCD-841-CoN細胞系相關產品：DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
細胞生長：貼壁
U-118MG epithelioid cells人腦星形膠質母細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HIT T-15細胞系相關產品：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞
Namalwa細胞系相關產品：A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
H-716細胞系相關產品：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞
U-87細胞系相關產品：LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
Y 1細胞系相關產品：MESSA/Dx5細胞、U-251-MG細胞、P3J HR-1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
U-118MG epithelioid cells人腦星形膠質母細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數，傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
JCA-1細胞系相關產品：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
MDCK.2細胞系相關產品：Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
PL11細胞系相關產品：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
WBF344細胞系相關產品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
AN3CA細胞系相關產品：MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
MRMT-1細胞系相關產品：HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
SW 1463細胞系相關產品：HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞
H820細胞系相關產品：CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞
TE-14細胞系相關產品：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
QBI-293A細胞系相關產品：G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
U-118MG epithelioid cells人腦星形膠質母細胞系
Ej138細胞系相關產品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
NOR-10細胞系相關產品：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
3T3-Swiss albino細胞系相關產品：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞
BC-024細胞系相關產品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
OVMANA細胞系相關產品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
J774 A.1細胞系相關產品：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
J774 A.1細胞系相關產品：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
KYSE50細胞系相關產品：HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
NCI-157細胞系相關產品：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞
N-87細胞系相關產品：108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
CCRF-SB細胞系相關產品：RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞
EB-1細胞系相關產品：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞
Adeno-293細胞系相關產品：VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
AU-565細胞系相關產品：LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
KP-2細胞系相關產品：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
HS-294細胞系相關產品：KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
A2008細胞系相關產品：OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
TE-10細胞系相關產品：NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
343MG細胞系相關產品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
MKN-7細胞系相關產品：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
TM3細胞系相關產品：HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
HCT/Taxo1細胞系相關產品：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
MDAMB157細胞系相關產品：MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
BRL-3A細胞系相關產品：Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞
TPC1細胞系相關產品：TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
H1385細胞系相關產品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
MV3細胞系相關產品：TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
R2C細胞系相關產品：Y3-Ag1,2,3細胞、SW-620細胞、HOP-92細胞
Hs-600-T細胞系相關產品：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
H157細胞系相關產品：CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞
TR146細胞系相關產品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
IM95細胞系相關產品：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
KE-37細胞系相關產品：KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
P30/Ohkubo細胞系相關產品：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
H-1876細胞系相關產品：DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
ECV 304細胞系相關產品：SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
H-740細胞系相關產品：UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞
HUSMC細胞系相關產品：H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
HIEC細胞系相關產品：Hs 600.T細胞、DoHH-2細胞、CCRF.CEM細胞
Duke University 4475細胞系相關產品：SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關產品：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
SK.MEL.2細胞系相關產品：Strain KB細胞、NIH-3T3-L1細胞、95-D細胞
SUM102PT細胞系相關產品：H-920細胞、TE 354.T細胞、Chang liver細胞
H-2081細胞系相關產品：PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞
HT144mel細胞系相關產品：MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關產品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
NCI-H508細胞系相關產品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
NCIH64細胞系相關產品：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
Y3M細胞系相關產品：HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
H22細胞系相關產品：KYSE 70細胞、Y3Ag1.2.3細胞、Glioma 261細胞
HCC-1569細胞系相關產品：WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
U-118MG epithelioid cells人腦星形膠質母細胞系
BNL CL2細胞系相關產品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
SU-86-86細胞系相關產品：HCA 7細胞、HSAS1細胞、H-2452細胞
CF PAC-1細胞系相關產品：WSU-DLCL(2)細胞、SK Hep1細胞、NCI-H295細胞
PL11細胞系相關產品：BHK細胞、MDA-MB-175細胞、D341Med細胞
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