"U-343MG Adherent人腦膠質瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經過三個階段:游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數/100個細胞。一般細胞分裂指數介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數增生期(對數生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
U-343MG Adherent人腦膠質瘤細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
MRC-9細胞系相關產品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
HMC3細胞系相關產品:LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
Det 562細胞系相關產品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
NCI-SNU-C1細胞系相關產品:SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關產品:SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
SK-MES1細胞系相關產品:G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
細胞生長特性:貼壁生長
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細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數);4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
NMCG1細胞系相關產品:HBVSMC細胞、SaOS-2細胞、HEK-EBNA細胞
HS940細胞系相關產品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
PC 61細胞系相關產品:CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞
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HEC1B細胞系相關產品:PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞
Jurkat77細胞系相關產品:HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞
CAL-78細胞系相關產品:NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
NCI.H23細胞系相關產品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
MC/CAR細胞系相關產品:A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞
EnCa1細胞系相關產品:K7M2-WT細胞、CHL-11細胞、NCI-H2023細胞
SUDHL6細胞系相關產品:H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
HCCC-9810細胞系相關產品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞
OCUM-1細胞系相關產品:MDA-MB-157細胞、NCI-H1666細胞、HEK (AD293)細胞
U-343MG Adherent人腦膠質瘤細胞系
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HCC0827細胞系相關產品:RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞
MILE SVEN 1細胞系相關產品:AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
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SW-403細胞系相關產品:TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
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LTEPsm細胞系相關產品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
KYSE 510細胞系相關產品:NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
Human ErythroLeukemia細胞系相關產品:EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞
HB 611細胞系相關產品:RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
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JM細胞系相關產品:NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞
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HCC-2935細胞系相關產品:746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞
OV3121細胞系相關產品:BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞
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MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關產品:SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞
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LN299細胞系相關產品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關產品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
HEK293-F細胞系相關產品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
KU-812-F細胞系相關產品:SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
HLE-SRA-01/04細胞系相關產品:Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
HLE-SRA-01/04細胞系相關產品:Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
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HCT-8細胞系相關產品:NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞
SK-RC-52細胞系相關產品:SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
SK-N-MC細胞系相關產品:Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
U-343MG Adherent人腦膠質瘤細胞系
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L-M (TK-)細胞系相關產品:Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
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HCT 8細胞系相關產品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
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P 3 HR 1細胞系相關產品:SK-MEL-31細胞、BAC1.2F5細胞、RSC 96細胞
PC 61細胞系相關產品:CCF-STTG1細胞、NCIH1385細胞、MAD109細胞
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