"NCI-H28 Adherent人惡性間皮瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H28 Adherent人惡性間皮瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
L78細胞系相關產(chǎn)品：L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
NCI-H719細胞系相關產(chǎn)品：Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞
CW2細胞系相關產(chǎn)品：Epstein-Barr-2細胞、MJ細胞、HS 683T細胞
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，每周換液２-３次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關產(chǎn)品：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關產(chǎn)品：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
SK RC 20細胞系相關產(chǎn)品：OV1-P細胞、3T3-J2細胞、P3X63Ag8細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCI-H28 Adherent人惡性間皮瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
Hs 27細胞系相關產(chǎn)品：TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞
OC316細胞系相關產(chǎn)品：COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
GRSL細胞系相關產(chǎn)品：Granta519細胞、DBTRG-05MG細胞、NCI-H1836細胞
C-643細胞系相關產(chǎn)品：AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
H1573細胞系相關產(chǎn)品：HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
NCIH810細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
MOLT 16細胞系相關產(chǎn)品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
DoHH-2細胞系相關產(chǎn)品：MSCs（mUCMSCs）細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
U-226AR1細胞系相關產(chǎn)品：H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
HCC1171細胞系相關產(chǎn)品：Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
MCF12F細胞系相關產(chǎn)品：hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞
JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關產(chǎn)品：JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞
NCI-H28 Adherent人惡性間皮瘤細胞系
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
Colo16細胞系相關產(chǎn)品：HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
MC-38細胞系相關產(chǎn)品：OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
MC-38細胞系相關產(chǎn)品：OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
KMH2細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞
PLA-802細胞系相關產(chǎn)品：BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
MDA-MB 468細胞系相關產(chǎn)品：U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞
SVGp12細胞系相關產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
HCC1143細胞系相關產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
Hs729細胞系相關產(chǎn)品：Panc 08.13細胞、HONE1細胞、MC3T3-E細胞
HOMEC細胞系相關產(chǎn)品：SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
P3-X63.Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞
CCD 841 CoN細胞系相關產(chǎn)品：SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞
BTT739細胞系相關產(chǎn)品：U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞
A-1847細胞系相關產(chǎn)品：SL-29細胞、HuTu-80細胞、6-T CEM細胞
Roswell Park Memorial Institute 1788細胞系相關產(chǎn)品：EM3細胞、SGC7901/DDP細胞、C3H10T1/2細胞
CL1.0細胞系相關產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
SupB15W細胞系相關產(chǎn)品：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
Panc-08.13細胞系相關產(chǎn)品：C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
BHK 21細胞系相關產(chǎn)品：NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞
TE9細胞系相關產(chǎn)品：GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞
BE(2)M17細胞系相關產(chǎn)品：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞
Hce8693細胞系相關產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
SW-48細胞系相關產(chǎn)品：COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
A-2780細胞系相關產(chǎn)品：H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞
UM-UC14細胞系相關產(chǎn)品：NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關產(chǎn)品：HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關產(chǎn)品：EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞
MDA-MB-436細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
KP 4細胞系相關產(chǎn)品：Saos2細胞、D341Med細胞、CCD 19Lu細胞
Mo7e細胞系相關產(chǎn)品：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
Mhh-Call 2細胞系相關產(chǎn)品：GP2-293細胞、RBVEC細胞、J 774A.1細胞
HCC15細胞系相關產(chǎn)品：FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞
RPMI no. 8226細胞系相關產(chǎn)品：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
SiHa細胞系相關產(chǎn)品：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
NCI-H-69細胞系相關產(chǎn)品：DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞
LY-R細胞系相關產(chǎn)品：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
HEK-A細胞系相關產(chǎn)品：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
SNU-761細胞系相關產(chǎn)品：HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞
S180細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
KM H-2細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1838細胞、Kit 225細胞、AZ521細胞
NCI-H28 Adherent人惡性間皮瘤細胞系
OCI/AML5細胞系相關產(chǎn)品：ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
NCI-H727細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
4T1-LUC細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
SW900細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
NCI-H1930細胞系相關產(chǎn)品：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
SUM-159-PT細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞
RWPE1細胞系相關產(chǎn)品：Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
NCIADR.RES細胞系相關產(chǎn)品：SUNE 1細胞、SU-DHL-5細胞、3LL細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
BpRcl細胞系相關產(chǎn)品：HTR-8/SV neo細胞、MOLT 16細胞、Glioma 261細胞
IMR32細胞系相關產(chǎn)品：Tu686細胞、SUDHL-5細胞、CP-70細胞
Granta519細胞系相關產(chǎn)品：TE15細胞、Hs870T細胞、NCIH211細胞
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