"ECC12 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
ECC12 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細(xì)胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞
C28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO/dhFr-細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞、526 mel細(xì)胞
C 643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 01細(xì)胞、HTh74細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-27細(xì)胞、H929細(xì)胞、SW480E細(xì)胞
FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞
GM03573A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 5.04細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
ECC12 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細(xì)胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞
BC3H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T9細(xì)胞、OC 316細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞
SUM-159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞
LoMeT-ccRcc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMCs細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞
MDA MB 134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞
SW1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞
P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞
HcerEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-596細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞
EJ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Functional Liver Cell-7細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞
NP-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4-II-E細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞
MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞
SW-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B35細(xì)胞、RH35細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞
ECC12 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
MFM-223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU-1細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞
SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞
GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞
GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞
HPAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞
NHDF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞
ST486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK1細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞、CHP100細(xì)胞
MC3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞
KYSE0520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1細(xì)胞、RM-1細(xì)胞、S16細(xì)胞
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞
G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
OSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞
HCC2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL2細(xì)胞、MXI細(xì)胞、SW1783細(xì)胞
H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞
MMQ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞
J 111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2030細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞、L929細(xì)胞
CCRF-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-601細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞
DU 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Lens-124細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞
EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞
L5178YR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞
Sp 2817細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞
H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞
Evsa-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞
KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞
Adeno 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞
3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞
H-4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8505C細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞
LAD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293FT細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞、MLFC細(xì)胞
HNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN-8細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞
PLA801-95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞
RBL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS79細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞
MT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAC細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞、BBE細(xì)胞
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
Mink Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1915細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞
P3HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-OV-3細(xì)胞、REC 1細(xì)胞、KMS11細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞
ECC12 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
DKMG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞
MDA-MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hUC-MSC細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞
CEMC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDLF細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞
BALB/3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-ori細(xì)胞、RC-2細(xì)胞、LS-174細(xì)胞
Hs 281.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-DM細(xì)胞、NCM460細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞
Sp2/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1623細(xì)胞、LS180細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞
D283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞
CF-1 MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、PK-13細(xì)胞、H1793細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細(xì)胞、C22細(xì)胞、H-2029細(xì)胞
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