"THLE-2 Adherent人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
THLE-2 Adherent人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞
32D clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A875細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞、N-9細(xì)胞
VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：６傳代；２-３天換液１次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
COLO-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細(xì)胞、COV 434細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞
OVCA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞
Sp 2817細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
THLE-2 Adherent人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
FAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dunn LM8細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞
RPMI.8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH250細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞
KU 19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine Turbinate細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞
SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞
ACT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2-Ad細(xì)胞、SW1990細(xì)胞、H1688細(xì)胞
6T-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-449細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞
H-1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細(xì)胞、C 6細(xì)胞、OC316細(xì)胞
OPM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92MI細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞、MSC細(xì)胞
NCIH322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1116細(xì)胞、H-865細(xì)胞、Henrietta Lacks cells細(xì)胞
CMT 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞
THLE-2 Adherent人肝永生化細(xì)胞系
CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞
B16 F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細(xì)胞、H-1703細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞
B16 F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細(xì)胞、H-1703細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞
GH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC090細(xì)胞、HCT15細(xì)胞、293T細(xì)胞
K7M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569D細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞
PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞
Lu-165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞
RN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞
Caco-2/BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB-1 Lu細(xì)胞、NB4細(xì)胞、TE 671細(xì)胞
PaTu 8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：22Rv1細(xì)胞、HK2細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞
SJRH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、746T細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞
CTLA4Ig-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-H細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞、A2008細(xì)胞
Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞
HOMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞
CHO/dhFr-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細(xì)胞、NOK細(xì)胞、HT 115細(xì)胞
SUM 190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞
253J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3569細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、RT4P細(xì)胞
NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
EBTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE2細(xì)胞、SNU869細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞
HCV-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.L.4細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞
H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4-I細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、T8細(xì)胞
MARC 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞
HMEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain V細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、H1184細(xì)胞
TALL-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mino細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞
CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞
LTEP-a-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BOWES細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞、A498細(xì)胞
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞
U-251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1116細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞
SW 982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞
GL-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞
H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞
HEK 293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKML-28細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞
108CC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW 42細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞、RT 112細(xì)胞
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細(xì)胞、FC33細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞
NCI-BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞
Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞
BEL 7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo205細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞
THLE-2 Adherent人肝永生化細(xì)胞系
Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞
GM03573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、GM03320細(xì)胞、H-2141細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞
SNU-869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞
MDA-MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細(xì)胞、A375S2細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
Tj-905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞
EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞
X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CemT4細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
Hmy.2 CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞
RPMI.8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH250細(xì)胞、RTE細(xì)胞、GM02131細(xì)胞
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