"NCI-H1876 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1876 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
T98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞
細胞傳代方法:每周換液2次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SUDHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞
IM-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞
HEK-293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NCI-H1876 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結(jié)果。1)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
253JBV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞
NCI-H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞
DMS-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞
CL40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞
UPCI-SCC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞
HRIF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
GM07404D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
NCI-H1876 Adherent人小細胞肺癌細胞系
BJA-B-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞
SF126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞
A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
PANC0504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
P3X63 AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33細胞、P-2003細胞、PANC-10-05細胞
16HBEo-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
NKM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
Caco-2/BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞
LWnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
NPC-TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
NCIH250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH322細胞、8305-C細胞、SNU-761細胞
MHCC97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞
MGH-U3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-K8細胞、AR4-2J細胞、PANC1005細胞
NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
QGY7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343細胞、CX1細胞、AM細胞
CT26.CL25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-435細胞、H-64細胞、H2122細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
NCI-N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
P-388細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞
Hs695細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
0V-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞
IGROV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
DHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞
PC12(高分化)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞
SW 982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品:766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞
AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
NCI-H1876 Adherent人小細胞肺癌細胞系
BT-325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI6細胞、C22細胞、LM(TK-)細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞
b.End3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
BE2M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
NCI-H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22細胞、SUDHL-8細胞、HCC1395細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1463細胞、3T3-F442A細胞、RWPE1細胞
DMS-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U031細胞、751-NA細胞、NCI-H157細胞
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