"D341 Med Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
D341 Med Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數實驗，比如病毒包裝，對細胞代數，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性，來使得細胞脫離基質附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
130T細胞系相關產品：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
H1693細胞系相關產品：PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞
GM03573細胞系相關產品：L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞
細胞傳代方法：每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
H-647細胞系相關產品：Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
hTERT-RPE-1細胞系相關產品：SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞
H1373細胞系相關產品：Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞
細胞生長特性：懸浮生長
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細胞形態(tài)特性：髓母細胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數板計數后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
NWA細胞系相關產品：NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
KE 37細胞系相關產品：SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
Y3M細胞系相關產品：HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
Hs 683.T細胞系相關產品：TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
MDAMB361細胞系相關產品：HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞
K-562細胞系相關產品：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
P3X63Ag8.653細胞系相關產品：SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞
NCI H157細胞系相關產品：Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞
IMR 32細胞系相關產品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
H-2126細胞系相關產品：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
AMC-HN8細胞系相關產品：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
BEL/FU細胞系相關產品：KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
L-5178-Y細胞系相關產品：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
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WI-38細胞系相關產品：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
MDA-157細胞系相關產品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞
EBC1細胞系相關產品：Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
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COLO 320HSR細胞系相關產品：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞
MES23.5細胞系相關產品：NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關產品：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
RAT2細胞系相關產品：Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
HTR8/SVneo細胞系相關產品：COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
NCI-H1355細胞系相關產品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
EST81細胞系相關產品：HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞
BC-028細胞系相關產品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
HCE-T細胞系相關產品：Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞
32D.3細胞系相關產品：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
Malme-3 M細胞系相關產品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
MC-CAR細胞系相關產品：NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞
VCaP細胞系相關產品：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關產品：Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
CAL85-1細胞系相關產品：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
Y3-Ag1,2,3細胞系相關產品：HO-8910細胞、CD18/HPAF細胞、LLC-MK2細胞
Line 207細胞系相關產品：HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關產品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
UMRC2細胞系相關產品：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞
HEL92.1.7細胞系相關產品：MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞
HCC-1143細胞系相關產品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
NCI-H1184細胞系相關產品：H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞
Mo 59J細胞系相關產品：GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
Hs729T細胞系相關產品：NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞
Chang Cells細胞系相關產品：Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞
184A1細胞系相關產品：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞
SMA-560細胞系相關產品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
HPB-ALL細胞系相關產品：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
MXI細胞系相關產品：Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞
MN60細胞系相關產品：COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
293S細胞系相關產品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
RGE細胞系相關產品：Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞
H184A1細胞系相關產品：28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
H184A1細胞系相關產品：28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
NCI-H2198細胞系相關產品：Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
C17細胞系相關產品：MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
T173細胞系相關產品：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
SUDHL-10細胞系相關產品：MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
D341 Med Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
HS-940-T細胞系相關產品：Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
VP303細胞系相關產品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
Hs 445細胞系相關產品：OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞
Z310細胞系相關產品：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
RT-112細胞系相關產品：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關產品：Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
SK ES 01細胞系相關產品：MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
B16 melanoma細胞系相關產品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
HepG2/C3A細胞系相關產品：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
C518細胞系相關產品：MES-SA/Dx-5細胞、CCD 966SK細胞、SKO-007細胞
TO 175.T細胞系相關產品：RAW264.7細胞、J774 A.1細胞、SKCol1細胞
Y3M細胞系相關產品：HCCLM3細胞、MDCKII細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
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