"B16-F1 Adherent小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
B16-F1 Adherent小鼠黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞凍存知識普及：細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-１９６℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度５%.１５%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細胞損傷。 采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細胞存活。標(biāo)準冷凍速度開始為-１到-２℃/min，當(dāng)溫度低于-２５℃時可加速，到-８０℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-１９６℃)。
SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
HuO9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
NT2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞
細胞生長特性：貼壁生長
B16-F1 Adherent小鼠黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
UPCISCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
HPDLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
MM1-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383細胞、L-M (TK-)細胞、UMRC2細胞
Sp2/O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞
SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞
SN4741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CRFK細胞、SuperTube細胞、NB9細胞
B16/F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞
SKN-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞
Karpas-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
MIN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
B16-F1 Adherent小鼠黑色素瘤細胞系
MBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
BI-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞
MeT 5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
CL40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
HASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞
HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞
HCC95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
PAMC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
Tu-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞
TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞
LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞
Case 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
MDA-MB-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
NCI-H1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-520細胞、MESSA細胞、H-748細胞
GM07404D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
PA I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
C42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞
STTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞
NEC8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞
OCI Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
HEI193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD1細胞、138MG細胞、UMNSAH/DF-1細胞
C666-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞
U138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
SK-Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
JURKAT E-61細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
HEK-293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞
HGC27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
HRMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
B16-F1 Adherent小鼠黑色素瘤細胞系
HCE-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
LS-123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 739.T細胞、HEK293-F細胞、H2330細胞
SaOS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2058細胞、HO8910PM細胞、LNCaP-FGC細胞
SUM 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞
COV-362細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞
U-138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
HIBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
NCIH2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞
CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-4細胞、PC-12細胞、MLFC細胞
Panc2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2-C8細胞、Hs 895.T細胞、SW 1417細胞
MM1-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383細胞、CTLL-2細胞、PNT-1A細胞
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