"Caki-1 Adherent人腎透明細胞癌細胞系
細胞背景資料:該細胞超微結(jié)構(gòu)中包含許多微絨毛、少許微絲、許多小線粒體、發(fā)達的高爾基休和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、許多脂滴和多層體、次級溶酶體,沒有發(fā)現(xiàn)病毒顆粒。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Caki-1 Adherent人腎透明細胞癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
LLCMK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞
SW480細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞
EAhy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞
HCC94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
細胞生長特性:貼壁生長
Caki-1 Adherent人腎透明細胞癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
HHFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
TGHAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞
HEK 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
SUM-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
HCC1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
SNU216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
A72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞
PLC/PRF/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
GM03320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
Caki-1 Adherent人腎透明細胞癌細胞系
hTERT-RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
SCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
SW 1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
L-Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
Colo-678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞
ECC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
NCI H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
YTMLC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
A-253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
GFP-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞
8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
Mo7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
MDA-MB-435 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞
LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
MAVER-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
4T1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞
FHC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
Kasumi-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
A375mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
PC 61-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞
SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
KCL22S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞
HCT-GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞
SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞
PC-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
KYSE-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
IPEC-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
Caki-1 Adherent人腎透明細胞癌細胞系
GDM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
ASH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
NCI.H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞
OVCAR-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
Hs294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞
HeLa S 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
NCI-H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細胞、RPMI1788細胞、QGP1細胞
H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU620細胞、Hs-746T細胞、MCF-7/ADR-RES細胞
HEK 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKML-28細胞、LTEP a2細胞、SY5Y細胞
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