"MDA-MB-435S Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:MDA-MB-435S是一種紡錘形的細(xì)胞,1976年由其親本(435)中篩選得到。435是從31歲的轉(zhuǎn)移性乳腺導(dǎo)管腺癌女性患者胸水中分離得到。當(dāng)用熒光染料對微管蛋白進(jìn)行染色時親本細(xì)胞顯現(xiàn)散布特征(II型)。最近通過cDNA陣列研究表明,親本(MDA-MB-435)可歸入黑素瘤起源。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題,一不留神就會全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法,希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助:1)觀察細(xì)胞狀態(tài):貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%,即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài);2)細(xì)胞清洗:培養(yǎng)皿表面消毒后,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液,加入12mlPBS,輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞,隨后吸除PBS清洗液;3)細(xì)胞消化:將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中,完全覆蓋細(xì)胞,置于顯微鏡下觀察(期間禁止搖晃培養(yǎng)皿),當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時,立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余約0.5ml胰酶,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化,每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài),至細(xì)胞成流沙狀完全脫落,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,加入12ml完全培養(yǎng)基,終止消化;4)細(xì)胞離心:將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻,吸取至15ml離心管中,1000r/min(110g),離心3min;5)細(xì)胞凍存:離心后去除細(xì)胞上清液,按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml,吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀,吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中,進(jìn)行凍存;6)細(xì)胞保藏:凍存管做好標(biāo)記,放至程序降溫盒中,于4℃冰箱放置30min,轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜,將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MDA-MB-435S Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細(xì)胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時細(xì)胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細(xì)胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液;2)吸細(xì)胞懸液入離心管:將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?!痉盅b稀釋細(xì)胞操作】1)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量,必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長,傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標(biāo)記;2)分裝:將細(xì)胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
A20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE2細(xì)胞、HME1細(xì)胞、95C細(xì)胞
Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-11細(xì)胞、H-128細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞
H-2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞、Caco2-BBE細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SKLMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞
SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞
INS1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1B細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
MDA-MB-435S Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:紡錘形
接收細(xì)胞相關(guān)問題:如不能在收到細(xì)胞后及時操作細(xì)胞,T25及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在37度過夜,血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置1-2天(注意不要放冰箱),干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時將細(xì)胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升華,請即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境,同時使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁,此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞,可以收集上清后離心(1200rpm,5min)后,將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中,由于不斷震蕩及環(huán)境不適,可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡,從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下,平衡后,貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可;懸浮細(xì)胞可以離心(1000rpm,3min)收集細(xì)胞,并用PBS重懸后再離心一次,再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
HT-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC-1細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、Line 522細(xì)胞
Balb/c 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACCM細(xì)胞、NRK細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞
OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
Hs 729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Hep1細(xì)胞、YES-2細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞
WISH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN 93細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞
SNB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV21細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞、H748細(xì)胞
MG-63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞、FK81細(xì)胞
TE10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79-4細(xì)胞、GM12878細(xì)胞、MPC5細(xì)胞
COLO-320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GEO細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞、SW1353細(xì)胞
U266-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0403細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞
HEL299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV3細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞
DMS 273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN-3細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞
MDA-MB-435S Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
Mouse Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC1細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞
MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞
SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞
SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞
TE10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79-4細(xì)胞、GM12878細(xì)胞、MPC5細(xì)胞
CMT-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2d細(xì)胞、tdott細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞
C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-024細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞
PC-9/S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86-86細(xì)胞、H-498細(xì)胞、D407細(xì)胞
NCIH23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD-3細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞
130T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞
Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87細(xì)胞、SNU761細(xì)胞、3396細(xì)胞
CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1788細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞
Mhh-Call 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2-293細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞
NCL-H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM13細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞
BC-022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL-4細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞
Swiss 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219D細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、KM-12細(xì)胞
BHK 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-1細(xì)胞、LLC細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞
Vx2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞
A-1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL-29細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞
HLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞
SKG-3a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞
Panc813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-E6細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞
RERF-LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞
BA/F3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞
HCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCaBER細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞
RFL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC2B細(xì)胞、PG13細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞
K562/ADP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH-30細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞
SN12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞
NCI-H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞
NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞
Vero C1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206F細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞、TW01細(xì)胞
SUM-52-PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 175 VII細(xì)胞、HN13細(xì)胞、HuH1細(xì)胞
H1650_CO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細(xì)胞、SW948細(xì)胞、H295R細(xì)胞
A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞
LN299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞、EB-1細(xì)胞
RD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACCLM細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞
MDA-MB-435S Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
MB 157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC090細(xì)胞、Z-138細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞
Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
TCCSUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DiFi細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞
293-GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG 44細(xì)胞、SKES1細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
CCRF-SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM 1細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、C12細(xì)胞
LO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 29細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細(xì)胞、AML-12細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞
SW-1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2342細(xì)胞、U266S細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞、Med 341細(xì)胞
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