"Cates-1B Lymphoblastoid cells人睪丸淋巴胚胎性癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
MCCAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞
STC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-686細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞、NIH/3T3細胞
細胞生長:懸浮
Cates-1B Lymphoblastoid cells人睪丸淋巴胚胎性癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
MSTO211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
OCI-LY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
NCI-H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H735細胞、PL 45細胞、MHCC 97-H細胞
C166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞
HOS TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Cates-1B Lymphoblastoid cells人睪丸淋巴胚胎性癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
H-735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞
251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞
Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
Hca-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞
HLEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞
H-1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
hADSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
MV4II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
LIXC-002細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞
Cates-1B Lymphoblastoid cells人睪丸淋巴胚胎性癌細胞系
NCIH358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO-1細胞、Giant Cell Tumor細胞、COS-1細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
HSAS4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
PANC0504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
LICCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞
LICCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞
huH 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
LNCaP-Clone-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞
SK-N-BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
KNS62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK-2細胞、AML12細胞、SKNEP-1細胞
HLEB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
U-118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH82細胞、NTHY-ORI3.1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞
COLO 679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞
U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
NE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞
FHC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
Epstein-Barr-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
SK-N-BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
CCK-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞
Hce8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
RPMI 8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞
OLN 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞
NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞
ESC-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
RPMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞
HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
SJSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
H-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
HSAS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞
P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
NRK clone 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
GM06141B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
SLMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞
hTERT RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
UACC-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87細胞、SNU761細胞、3396細胞
NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
U87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞
SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
SK-ES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
Cates-1B Lymphoblastoid cells人睪丸淋巴胚胎性癌細胞系
U87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCET細胞、HS 1.Tes細胞、Panc10.05細胞
BIC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、NT2/D1細胞、HOS TE 85細胞
Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細胞、OCI-LY-8細胞、H-2023細胞
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