"MOLT-3 Lymphoblastoid cells人急性T淋巴細胞白血病細胞系
細胞背景資料:急性T淋巴細胞白血病;男性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
SK Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞
LNCaP-Clone-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞
細胞生長:懸浮
MOLT-3 Lymphoblastoid cells人急性T淋巴細胞白血病細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
AtT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
MHCC-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
HP615細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MOLT-3 Lymphoblastoid cells人急性T淋巴細胞白血病細胞系
細胞生長特性:懸浮
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
PANC-10-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-878細胞、TGBC11TKB細胞、B16 BL6細胞
8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
MA-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69/P細胞、UMUC-3細胞、Alexander cells細胞
C3H-10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
HCC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞
NU-GC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
MOLT-3 Lymphoblastoid cells人急性T淋巴細胞白血病細胞系
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞
Lung cancer-1/squamous細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
OVCA420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞
SUM-149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞
UCW 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
Anglne細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
SK-MES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
SW962細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞
SW626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
NCI-H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
DMS-153細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞
Ku812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞
LTEP-a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞
LOU-NH-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
NCI-H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
HCC4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞
IGROV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
6T-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞
MDAMB175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞
PL-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞
NALM-6-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞
Line 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
Monomac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
HEC-151細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
A-375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
A549 ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞
NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞
MBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
HAC-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞
190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
THLE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞
COLO320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
Reuber H-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞
BNL CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
MOLT-3 Lymphoblastoid cells人急性T淋巴細胞白血病細胞系
CAL-120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
HCC-9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細胞、HOS-MNNG細胞、NCIH526細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4B細胞、H3396細胞、HOP-62細胞
4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細胞、BL1339細胞、A2780CP70細胞
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