"KM933 Lymphoblastoid cellsEB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞系
細胞背景資料：B淋巴；EBV轉(zhuǎn)化
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
MH-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC366細胞、CG4細胞、COLO-680N細胞
細胞生長：懸浮
KM933 Lymphoblastoid cellsEB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
NHEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 435細胞、526 mel細胞、OCI-Ly 18細胞
FL62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KM933 Lymphoblastoid cellsEB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
HFSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞
RM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
SNU423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞
Alexander細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞
T-ALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
Hs-940細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81-A-1細胞、SK-Hep1細胞、751-NA-15細胞
SW620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
HFSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞
KM933 Lymphoblastoid cellsEB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞系
TALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
CCC-HSF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
Hs 840.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞
BAR-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞
B16 F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
B16 F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
Oka-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
Monomac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
SUDHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
SNU1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞
FM-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞
RAMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
Hs688(A)T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
KP-N-NS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞
beta-TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
Hs 706.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC4細胞、HCC1438細胞、HCC-1599細胞
Mono Mac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
SN-12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞
Bac12F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞
HEK-293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞
HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
H-2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
NRK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
LK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞
3T3 J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
LA-795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
HPAEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
HRPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞
IEC 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
PL45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
R3/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
OCI-AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞
HT-1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
TE 85 ClF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞
MDA330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞、ROS-17/2.8細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
LO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
TSU-Pr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞
343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
SUDHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
JROECL 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
KM933 Lymphoblastoid cellsEB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞系
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
KE-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細胞、CHO Lec1細胞、SuDHL 2細胞
B/C3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1672細胞、MHCC97L細胞、MESSA/Dx5細胞
SNU423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細胞、OCI-Ly01細胞、alphaTC1 Clone 6細胞
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