"SNK-1 Lymphoblastoid cells人NK/T細胞淋巴瘤細胞系
細胞背景資料:NK/T細胞淋巴瘤;女性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關產(chǎn)品:HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
H446細胞系相關產(chǎn)品:SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
NCIH2126細胞系相關產(chǎn)品:GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞
細胞生長:懸浮
SNK-1 Lymphoblastoid cells人NK/T細胞淋巴瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品:Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞
SKOV-433細胞系相關產(chǎn)品:H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞
8402細胞系相關產(chǎn)品:VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
VM-CUB-I細胞系相關產(chǎn)品:SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞
NCIH2196細胞系相關產(chǎn)品:HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SNK-1 Lymphoblastoid cells人NK/T細胞淋巴瘤細胞系
細胞生長特性:懸浮
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。
NB-9細胞系相關產(chǎn)品:LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
Case 3細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
C-28I2細胞系相關產(chǎn)品:RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
ISHI細胞系相關產(chǎn)品:SF17細胞、MC-26細胞、NCI-SNU-387細胞
SEM細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
HUT-28細胞系相關產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
IOSE-29細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
P3-Jiyoye細胞系相關產(chǎn)品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
SK 1細胞系相關產(chǎn)品:Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
BCaP 37細胞系相關產(chǎn)品:LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
SNK-1 Lymphoblastoid cells人NK/T細胞淋巴瘤細胞系
SK Mel 24細胞系相關產(chǎn)品:Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
GM 2132細胞系相關產(chǎn)品:GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞
HEK (AD293)細胞系相關產(chǎn)品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
Dakiki細胞系相關產(chǎn)品:LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
DMS114細胞系相關產(chǎn)品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
IM-95細胞系相關產(chǎn)品:A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
IM-95細胞系相關產(chǎn)品:A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
293/EBNA-1細胞系相關產(chǎn)品:SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞
SNB-19細胞系相關產(chǎn)品:LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞
HEL299細胞系相關產(chǎn)品:SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
SK N SH細胞系相關產(chǎn)品:MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
RetroPack PT67細胞系相關產(chǎn)品:MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞
8305C_1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞
HOC-1細胞系相關產(chǎn)品:SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞
APRE-19細胞系相關產(chǎn)品:HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞
BV173細胞系相關產(chǎn)品:RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
HCT.116細胞系相關產(chǎn)品:SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞
Normal Rat Kidney-52E細胞系相關產(chǎn)品:U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞
H446細胞系相關產(chǎn)品:SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
786-0WT細胞系相關產(chǎn)品:PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞
NK92細胞系相關產(chǎn)品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
HFLS-OA細胞系相關產(chǎn)品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
NCIH2342細胞系相關產(chǎn)品:RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞
H920細胞系相關產(chǎn)品:HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
Panc_05_04細胞系相關產(chǎn)品:JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞
QGY 7701細胞系相關產(chǎn)品:NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
Emory University-3細胞系相關產(chǎn)品:NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞
IOSE-Van細胞系相關產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
LS 513細胞系相關產(chǎn)品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
SKNDZ細胞系相關產(chǎn)品:751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
FL83B細胞系相關產(chǎn)品:H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
N2a細胞系相關產(chǎn)品:MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
TCC-SUP細胞系相關產(chǎn)品:NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
16-HBEo細胞系相關產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
RMG-1細胞系相關產(chǎn)品:V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
BT483細胞系相關產(chǎn)品:SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞
HT1197細胞系相關產(chǎn)品:190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關產(chǎn)品:OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
KYSE70細胞系相關產(chǎn)品:TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞
6T-CEM細胞系相關產(chǎn)品:SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞
H-2081細胞系相關產(chǎn)品:PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞
RS 4;11細胞系相關產(chǎn)品:MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
GB-1細胞系相關產(chǎn)品:DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
X63.Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞
CHP100細胞系相關產(chǎn)品:NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
NCI-H1876細胞系相關產(chǎn)品:H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
DH 82細胞系相關產(chǎn)品:A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
BC-024細胞系相關產(chǎn)品:MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
SVEC 4-10細胞系相關產(chǎn)品:H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞
HUT 226細胞系相關產(chǎn)品:HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
SNK-1 Lymphoblastoid cells人NK/T細胞淋巴瘤細胞系
H-2107細胞系相關產(chǎn)品:rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞
NUGC-3細胞系相關產(chǎn)品:H-735細胞、HuLEC-5a細胞、KAT5細胞
SV40 MES 13細胞系相關產(chǎn)品:DITNC1細胞、MN 60細胞、B16 subline B78細胞
C-28I2細胞系相關產(chǎn)品:RPPVEC細胞、PIG1細胞、P3-X63Ag8.653細胞
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