"HCC1954 BL Lymphoblastoid cells人外周血B細胞系
細胞背景資料:外周血B淋巴細胞;EBV轉(zhuǎn)化;女性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
SW 982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
FaDu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞
Huh-7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞
細胞生長:懸浮
HCC1954 BL Lymphoblastoid cells人外周血B細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
A375-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞
NB1-RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞
EO771細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC1954 BL Lymphoblastoid cells人外周血B細胞系
細胞生長特性:懸浮
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
H-220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞
HIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
T-47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
Normal fibroblast-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細胞、PNT1A細胞、JVM-2細胞
HCFB(HCF)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞
BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
H-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
HCC1954 BL Lymphoblastoid cells人外周血B細胞系
HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
Y3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞
BaF3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞
Caco 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞
H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
A-172MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
H-2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞
MDAMB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
EC-GI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
SNB.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞
OVCAR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞
L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
G292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
GM01232E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞
H-1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
Tb1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞
HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
Mono Mac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
AgC11x3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞
B16BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞
GLAG-66細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
U118細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞
Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
KBM5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM-1細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、NW38細胞
BV-173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞
GM2132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoTr細胞、H2347細胞、WEHI-3細胞
NK92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞
SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
A2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
NFHIOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
NFHIOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
OCI/AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
PG-LH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞
HEK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞
Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
DU 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
PAa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
HT55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞
HCC1954 BL Lymphoblastoid cells人外周血B細胞系
MKN-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4 C細胞、RKN細胞、ECC1細胞
Tu-177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUG-Chor1細胞、Hs1.Tes細胞、HEY A8細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細胞、A2780細胞、MC-38細胞
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