"Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:1967年,該細胞系KleinE和KleinG建系,源于一名16歲患有Burkitt's淋巴瘤的黑人男性,beta-2-微球蛋白陰性,表達EBNA,VCA,sIg。該細胞攜帶EB病毒,是一個典型的B淋巴母細胞系,可用于白血病發(fā)病機制的研究。 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 P3 (Jiyoye)細胞系相關產(chǎn)品:hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞 HO1-N1細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞 NK92細胞系相關產(chǎn)品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞 細胞生長:懸浮 Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2傳代 H295R細胞系相關產(chǎn)品:Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞 NMCG-1細胞系相關產(chǎn)品:GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞 NALM-6-M1細胞系相關產(chǎn)品:HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞 SUP-B1細胞系相關產(chǎn)品:RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞 CHP100細胞系相關產(chǎn)品:NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 NG10815細胞系相關產(chǎn)品:P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞 BNL-CL.2細胞系相關產(chǎn)品:NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞 DH-82細胞系相關產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞 TOV112D細胞系相關產(chǎn)品:MKN7細胞、EB1細胞、HIC細胞 HRGEC細胞系相關產(chǎn)品:OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞 293 HEK細胞系相關產(chǎn)品:FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞 C57 Mouse Tumor 64細胞系相關產(chǎn)品:BALB/3T3細胞、MDAPCa2b細胞、RT-4細胞 RKOE6細胞系相關產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞 Hep-3B細胞系相關產(chǎn)品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞 Hs940.T細胞系相關產(chǎn)品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞 Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤細胞系 CAL 148細胞系相關產(chǎn)品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞 MCA-205細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞 BC-PAP細胞系相關產(chǎn)品:NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞 H508細胞系相關產(chǎn)品:ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞 MCF 10A細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞 CCD-841-CoN細胞系相關產(chǎn)品:DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞 HMC3細胞系相關產(chǎn)品:LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞 IPLB-Sf21-AE細胞系相關產(chǎn)品:SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞 CII細胞系相關產(chǎn)品:MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞 JIMT-1細胞系相關產(chǎn)品:TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞 SKO007細胞系相關產(chǎn)品:L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞 BNL 1MEA.7R.1細胞系相關產(chǎn)品:CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞 H2126細胞系相關產(chǎn)品:AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞 M21細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞 ZR75_1細胞系相關產(chǎn)品:AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞 KCL22S細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞 H676細胞系相關產(chǎn)品:HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞 HLFa細胞系相關產(chǎn)品:H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞 686LN-M4e細胞系相關產(chǎn)品:HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞 SHP-77細胞系相關產(chǎn)品:NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞 DBTRG-05MG細胞系相關產(chǎn)品:EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞 PaTu 8988s細胞系相關產(chǎn)品:22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞 Ramos(RA1)細胞系相關產(chǎn)品:IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞 SuDHL 8細胞系相關產(chǎn)品:ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞 SV40-HCEC細胞系相關產(chǎn)品:IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞 Swiss/3T3細胞系相關產(chǎn)品:Human Fetal Thymocyte-8810細胞、LL/2 (LLC1)細胞、NCI-H2085細胞 HLEC-SRA 01/04細胞系相關產(chǎn)品:Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞 NCI-H1648細胞系相關產(chǎn)品:CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞 COLO394細胞系相關產(chǎn)品:373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞 X63-Ag 8.6.5.3細胞系相關產(chǎn)品:MX1細胞、FRH-0201細胞、H-1581細胞 IPLB-SF-21細胞系相關產(chǎn)品:Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞 Calu3細胞系相關產(chǎn)品:PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞 WRL68細胞系相關產(chǎn)品:D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞 MDAMB330細胞系相關產(chǎn)品:Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞 RAMSCs細胞系相關產(chǎn)品:H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞 KRC/Y細胞系相關產(chǎn)品:VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞 TC-1[JHU-1]細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞 Walker256-TC細胞系相關產(chǎn)品:WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞 LI7細胞系相關產(chǎn)品:BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞 SK_N_BE2C細胞系相關產(chǎn)品:MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞 LIM 1215細胞系相關產(chǎn)品:U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞 Hep 3B細胞系相關產(chǎn)品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞 L540細胞系相關產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞 A-673細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞 BMDC細胞系相關產(chǎn)品:KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞 Pa18C細胞系相關產(chǎn)品:HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞 MDA-MB-175細胞系相關產(chǎn)品:293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞 EB-3細胞系相關產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞 LX-2細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞 BCPAP細胞系相關產(chǎn)品:NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞 D341Med細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞 Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤細胞系 293AD細胞系相關產(chǎn)品:AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞 RCC10RGB細胞系相關產(chǎn)品:PLA801-95C細胞、1E8-H細胞、U266-B1細胞 GM03573細胞系相關產(chǎn)品:L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、U373細胞、LICR-HN-6細胞 DH-82細胞系相關產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、WSU-DLCL-2細胞、WEHI 164細胞 "
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