"HFLS-RA fibroblast cells類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞背景資料：關(guān)節(jié)；成纖維細胞
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
LTEP-a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞
細胞生長：貼壁
HFLS-RA fibroblast cells類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明：成纖維細胞：來自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān)；來自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質(zhì)合成速度降低，已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化，特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時，細胞核，線粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因，尚無定論，出現(xiàn)過好幾種理論與假說，其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?，F(xiàn)象，常見的細胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中，因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導(dǎo)致一部分細胞死去，稱為細胞的病理死亡，或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細胞死亡；細胞毒性是由細胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件，不依賴于其它兩種細胞死亡機理，如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況，一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡，是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程，無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說，都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用，在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結(jié)果將是可怕的：凋亡不足時，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
MT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞
NCI-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
1301細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HFLS-RA fibroblast cells類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
NRK-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
Mouse Forestomach Carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞
SUM-52-PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞
DAKIKI Clone 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞
MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
686LN-M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞
OCI/AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
K299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
VERO C 1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
HFLS-RA fibroblast cells類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
Panc04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
KLN 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175細胞、COLO357細胞、Hep3B細胞
KLN 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175細胞、COLO357細胞、Hep3B細胞
LC-1-sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
SW-1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞
NR-8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU4細胞、NK92細胞、HFL 1細胞
F36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞
NCI-SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
2B4-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞
Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
BALB/3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
MNNGHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
NSC-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
MHCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞
HFT8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞
KALS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
GM04679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
Hs683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞
Granta-519細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS13細胞、RPMI 8226/S細胞、SUM 102PT細胞
HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
LS 174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
DMS-273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞
BIU-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞
Hs 683.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞
P 815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
LU65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞
COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞
RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
SW-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
MTEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1833細胞、Vero 76 clone E6細胞、HS-294細胞
MCF 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
SK-N-BE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
H-2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
Emory University-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞
MBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
HFLS-RA fibroblast cells類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
SUM-159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞
CF Pac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細胞、TK10細胞、293A細胞
CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、B16/F1細胞、Microbiological Associates-104細胞
Mouse Forestomach Carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 205細胞、SLMT-1細胞、YT細胞
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