"BSC40 epithelioid cells非洲綠猴腎細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:腎;自發(fā)永生 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 NCIH1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMSC細(xì)胞、D341細(xì)胞、T. T細(xì)胞 HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞 293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細(xì)胞、T_T_細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 BSC40 epithelioid cells非洲綠猴腎細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細(xì)胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-6細(xì)胞、L-929細(xì)胞、SW 756細(xì)胞 Sp2/0-Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1404細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞 H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞 Saos2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞 GA-10 clone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 BSC40 epithelioid cells非洲綠猴腎細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 Nittby-Salford 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAK+/+細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Dx5細(xì)胞 2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞 ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE4細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞 ATN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞、H1915細(xì)胞 University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞 SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞 SW1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-GEO細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞 A9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1688細(xì)胞、H-1573細(xì)胞、A-10細(xì)胞 Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞 HuT 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞 BSC40 epithelioid cells非洲綠猴腎細(xì)胞系 SK Col 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞 PC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-69細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞 JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354.T細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞 IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞 H-820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M IE8細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞 GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞 GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞 CCC-ESF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞 U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞 H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、N87細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞 R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞 Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞 MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞 Vero C1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206F細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞、TW01細(xì)胞 TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞 CHAGOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞 NCI-H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK 1細(xì)胞、COLO394細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞 SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 2細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞 LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞 WM115F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞 Hi-five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞 ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞 SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞 SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞 NK92-MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞 BRL3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-164細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞 253J B-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞、H838細(xì)胞 BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞 Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞 HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞 H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞 Tn5 B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞、B-3細(xì)胞 CCRF-CEM C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIMEC細(xì)胞、FaDu細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞 TE7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞 MS-751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞 MARC145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞 MN 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H719細(xì)胞、639-V細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞 C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞 RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞 108CC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞、RT 112細(xì)胞 SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C41細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞 Vero 76 clone E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP 01細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞 MILE SVEN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-A31細(xì)胞、HuH7細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞 HN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA-1細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞、OSA細(xì)胞 OVCA-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞 COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞 AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-T細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞 MC57細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、NPA細(xì)胞 IM95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL279細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞 CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW-264.7細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞 BSC40 epithelioid cells非洲綠猴腎細(xì)胞系 L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-12細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞 SVOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞 Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupT1細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞 ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE4細(xì)胞、H820細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞 "
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