"K7M2-WT epithelioid cells小鼠骨肉瘤成骨細胞系
細胞背景資料：骨肉瘤；肺轉(zhuǎn)移；雌性；BALB/c
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
SUP-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
CL-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞
細胞生長：貼壁
K7M2-WT epithelioid cells小鼠骨肉瘤成骨細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
HO1N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞
MUS-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
K7M2-WT epithelioid cells小鼠骨肉瘤成骨細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
SU-86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
AtT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
MDA-MB-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞
MDA-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
HASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞
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Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
TEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
UMNSAH/DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞
CEM-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
CEM-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
C32 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA-DX5細胞、C1R細胞、NGEC細胞
MBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
IEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞
KAT5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞
NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
KLN 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175細胞、COLO357細胞、Hep3B細胞
NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
NCI H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
THLE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
HuPT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞
NB-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞
SuDHL 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞
D 407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞
hOMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
MonoMac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
TSCCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞
VK2 (E6/E7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞
BAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
NCIH2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
MV-4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
Tj-905細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
Fox/NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
N-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
H647ell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞
CHP126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞
COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
N1E115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
H-1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞
WEHI-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞
K7M2-WT epithelioid cells小鼠骨肉瘤成骨細胞系
Panc 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47-D細胞、Hs675T細胞、Pan02細胞
3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細胞、WEHI-3細胞、GA10細胞
hFOB 1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8細胞、N2a細胞、YAC-1細胞
AtT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細胞、Emory University-3細胞、RT112細胞
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