"ND7/23 epithelioid cells鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:神經(jīng)母細胞瘤
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL4細胞、HT細胞、HCEC-B4G12細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
細胞生長:貼壁
ND7/23 epithelioid cells鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
KYSE-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
HEK293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞
KYSE-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ND7/23 epithelioid cells鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
SW-962細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
HeLa 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
130-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
BHT101細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
Tb 1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
VK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞
hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞
Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
ND7/23 epithelioid cells鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
QGP 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞
OVCAR.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞
786-0WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞
HEK 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞
OCI/AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
Farage OL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞
HCT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞
P31 FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞
C4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞
NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞
H-2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
PC12(高分化)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞
SF 767細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞
MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
MDA-1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞
LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
Hs888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞
CFPAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
NCI-H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞
RCC23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
AD-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Hs 888Lu細胞
MC/CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞
HUT125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
PC12(高分化)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞
293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
CCRF/CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
NCIH727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
NB19-RIKEN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞
HEK293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞
Mouse Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC1細胞、SNU-484細胞、MDA-231細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
COLO 206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細胞、CCD 966 SK細胞、Hi-five細胞
MGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞
CHO/dhFr-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞
KOSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞
Nb-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞
V79-GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞
MT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
VAESBJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
ND7/23 epithelioid cells鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
KYSE270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細胞、H1703細胞、mIMCD3細胞
CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Carcinoma細胞、NCI-H102細胞、SW954細胞
HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細胞、NTERA2D1細胞、SW 48細胞
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