"HCV-29 epithelioid cells人膀胱上皮細胞系 細胞背景資料:膀胱;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 MFD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞 MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞 HSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞 細胞生長:貼壁 HCV-29 epithelioid cells人膀胱上皮細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Psi2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞 H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞 NCIH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞 GM00637F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞 SupT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HCV-29 epithelioid cells人膀胱上皮細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! JG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞 NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞 Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞 hTERT-HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞 H-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞 KMB17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞 MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞 C3H/10T1/2 CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT4細胞、NUGC3細胞、MCF.10A細胞 PCI-4.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞 Nb 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞 HCV-29 epithelioid cells人膀胱上皮細胞系 NCI-H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞 CHO Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、A375S2細胞 H4-II-EC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞 Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞 CA922細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞 Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞 Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞 HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞 CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細胞、L540細胞、74Int細胞 KRCY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞 NCIH2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞 HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞 Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞 BAC1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞 EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞 WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞 OCI-Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞 KYSE-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞 KAT-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞 H510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-5細胞、PLB 985細胞、COLO-741細胞 SUM-159細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞 HcerEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-596細胞、Hepa1-6細胞、hUC-MSC細胞 NCI-H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞 KM932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞 HEL9217細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞 SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞 NTera-2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞 BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞 SK-MES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞 tdott細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞 CAL-120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞 GC9811-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞 SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞 A101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞 OVCAR 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞 C-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞 HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞 KLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞 B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞 D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞 Mono-Mac-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞 MSCs(mUCMSCs)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞 RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞 OVISE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞 A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞 MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞 Hs606細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞 SNU423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞 CPA47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞 MLE 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞 CC-LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞 HCV-29 epithelioid cells人膀胱上皮細胞系 KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞 Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC25細胞、WC00097細胞、Mel624細胞 Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細胞、HEL-299細胞、3T3-F442A細胞 Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26.WT細胞、CCD1095Sk細胞、NCI747細胞 "
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