"MUG-Chor1 epithelioid cells人骶骨脊索瘤細胞系
細胞背景資料:骶骨脊索瘤;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
PC3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
NBL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞
細胞生長:貼壁
MUG-Chor1 epithelioid cells人骶骨脊索瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
M059K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG1細胞、C-Lu65細胞、M07e細胞
CFPAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞
786-0WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞
MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞
HT1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MUG-Chor1 epithelioid cells人骶骨脊索瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
MCF12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
U2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
PC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞
H-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
EA.hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
AE 1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
MUG-Chor1 epithelioid cells人骶骨脊索瘤細胞系
TE-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
HG2855細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞
Anip[973]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
RCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
67NR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞
Hs1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞
NCTC-3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
NCI-H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
J774 A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞
TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
NCIH1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1573細胞、OCIAML5細胞、MDCC-MSB1細胞
PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞
FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
L-M(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
EoL-1-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
Psi2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
Hs 739.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
RPMI-6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
CW-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2066細胞、C-4 I細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞
2PK-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
SK-HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
OCI Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
Colo16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
RBL-2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
KM933細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
MKN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
U-87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞
MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞
KYSE-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:95-D細胞、NCTC929細胞、3T3 L1細胞
H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
MUG-Chor1 epithelioid cells人骶骨脊索瘤細胞系
C3H-10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
J111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細胞、HuH6細胞、NCIH820細胞
KM12SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細胞、Panc10.05細胞、ECC-1細胞
U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細胞、OCI-LY-10細胞、GC9811-P細胞
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