"HN-6 epithelioid cells人舌鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:舌鱗癌;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
COR-L105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC1細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
HN-6 epithelioid cells人舌鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng),營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過(guò)可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小,不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見(jiàn)的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國(guó)外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁,一般來(lái)講,對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬(wàn)古霉素等完全不敏感;對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用,所以常不用來(lái)作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Y-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞、CX-1細(xì)胞
SKMEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞
Hs940T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞
TCMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT.64細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞、H-23細(xì)胞
HDLM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HN-6 epithelioid cells人舌鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
Evsa-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞
DoHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞
Jurkat FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-1395細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞、SNK6細(xì)胞
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
RCC 7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-205細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞
HFF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞
BEAS-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-1細(xì)胞、143TK-細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞
EFM192細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL8細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞
NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞
HN-6 epithelioid cells人舌鱗癌細(xì)胞系
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
NCIH1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jijoye細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞
RN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞
PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
Sp2/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1623細(xì)胞、LS180細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
Sp2/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1623細(xì)胞、LS180細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
RERF-LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞
CMT93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE1細(xì)胞、L cell細(xì)胞、LY細(xì)胞
HFT8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 3細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞
KBM7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞
Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞
C32 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA-DX5細(xì)胞、C1R細(xì)胞、NGEC細(xì)胞
SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV293細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞
102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、C2C12細(xì)胞
H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H748細(xì)胞、TE-7細(xì)胞、H2342細(xì)胞
SUNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141B細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞
Panc_03_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/Taxol細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞、GP293細(xì)胞
NCIH1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞
NR8383.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH520細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞、A2058細(xì)胞
2PK-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞
NCIH650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2 wt細(xì)胞、T 24細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞
T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞
Sp2/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1623細(xì)胞、LS180細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
MUM2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細(xì)胞、H-187細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞
H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞
149 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞
NCI-H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞
L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞
Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞
COV-362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAEC細(xì)胞、MKN45細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞
WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞
CaSki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF2細(xì)胞、EL 4細(xì)胞、KMS26細(xì)胞
TE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC316細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞
RPVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
BCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、High-5細(xì)胞、H-810細(xì)胞
UMR-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK 10a細(xì)胞、T8細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2227細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞
HOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98 G細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞、SW962細(xì)胞
ETCC007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞
BT-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H719細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞、Dami細(xì)胞
alpha-TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-527細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞、SLK細(xì)胞
HN-6 epithelioid cells人舌鱗癌細(xì)胞系
COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞
HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細(xì)胞、H-1869細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞
HOP 92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr/S細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞
Jurkat E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-2細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞
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