"MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠顱頂前骨細胞系
細胞背景資料：該細胞是從克隆的但是表型各異的MC３T３-E１細胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。 MC３T３亞克隆４（ATCC CRL-２５９３）和MC３T３亞克?。保矗ˋTCC CRL-２５９４）在抗壞血酸和３到４mM無機鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細胞分化。 它們１０天后形成一個礦化良好的細胞外基質(zhì)（ECM）。MC３T３亞克?。玻矗ˋTCC CRL-２５９４）和MC３T３亞克隆３０（ATCC CRL-２５９６）在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細胞分化
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
YTMLC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
細胞生長：貼壁
MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠顱頂前骨細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
KOSC-2 cl3-43細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞
MOLT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
SNB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠顱頂前骨細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
H-1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
RPMI-1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
Hs-343-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞
H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
5637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
HMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
Earle's L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞
WM266mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
HMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP細胞、SNU-387細胞、KU.812細胞
MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠顱頂前骨細胞系
T98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞
769P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH1細胞、AU-565細胞、H-1770細胞
293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞
T24(ECV304)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
MIN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
MIN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
SVG p12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1688細胞、HEP3B2細胞、CAL78細胞
HT1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
B-CPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
AZ521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
C 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞
IHHA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞
OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
NCI-H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320HSR細胞、HHUA細胞、ST486細胞
PC-9S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
U 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞
HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
McA-RH 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
MRASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、EC9706細胞、CCD-18Co細胞
MC116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-024細胞、NCI-H1693細胞、MDAMB453細胞
WERI-Rb 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
HT-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
Giant Cell Tumor細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞
C22 (Clara)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
H35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞
IEC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
JB6Cl30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
L78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
KYSE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞
BA/F3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
SKOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞
mIMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞
NR8383.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
SUM149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
Caco-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
WEHI 164 TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞
SCC-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2052細胞、COLO 320 DM細胞、SNG-M細胞
Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
MC3T3-E1 Subclone 14 epithelioid cells小鼠顱頂前骨細胞系
MXI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細胞、CEMC7細胞、OV2008細胞
TCCSUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DiFi細胞、TOV21G細胞、UMNSAH/DF#1細胞
Hs343T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 26細胞、HeLa-S3細胞、NCI-H1668細胞
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